ELISA实验常见样本类型处理

2020-07-07

1. 细胞培养上清
①收取细胞上清；
②离心10min（4℃，3000g），取上清。建议进行两次离心和取上清；
③建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存

2.血清
①不含抗凝剂的采血管采血，室温静置2小时（避免震动，防止溶血）；
②离心20min（4℃，3000g），取上清。建议进行两次离心和取上清；
③建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存

3.血浆
①含抗凝剂（EDTA、肝素，具体采取哪种抗凝剂，参考说明书）的采血管采血；
②离心20min（4℃，3000g），取上清。建议进行两次离心和取上清；
③建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存

4.细胞裂解液
①收集细胞，PBS清洗后，离心10min（1000g，4℃），弃去上清；
②加入适量裂解液（107细胞对应200-300ul裂解液），放置于4℃冰箱（20min）；
③离心10min（13000rpm，4℃），取上清，建议进行两次离心和取上清；
④测定BCA总蛋白浓度；
⑤建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存

5.组织裂解液
①适量裂解液加入组织中（10mg对应100-200ul裂解液）；
②组织破碎器处理组织至匀浆（冰上处理，放置于4℃冰箱（20min））；
③离心10min（13000rpm，4℃），取上清，建议进行两次离心和取上清；
④测定BCA总蛋白浓度；
⑤建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存

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