单分子RNA荧光原位杂交（GeneScope）：精准解析RNA时空表达的前沿技术

在生命科学研究中，精准定位并量化RNA在组织和细胞中的表达水平，是理解基因调控、细胞功能及疾病发生机制的关键。单分子RNA荧光原位杂交技术（amsFISH，也常被称为smFISH），凭借其超高灵敏度和单分子分辨率，已成为这一领域的核心工具。而爱必信（absin）推出的GeneScope多色单分子RNA荧光原位杂交产品，正是这一技术的高效解决方案。

一、amsFISH技术的核心原理

amsFISH的核心原理是利用多对短链DNA探针与目标RNA分子进行特异性杂交，再通过信号放大和荧光成像，实现对单个RNA分子的可视化和定量分析。

1、探针设计与杂交：针对目标RNA序列，设计5-10对（甚至更多）短的、带标记的DNA探针。这些探针能同时结合到同一个RNA分子的不同位点，形成稳定的杂交复合物。

2、信号放大：与传统FISH不同，amsFISH通过滚环扩增（RCA）等技术，将每个杂交探针的信号进行级联放大。这使得即使是低丰度的RNA分子，也能产生足够强的荧光信号，被显微镜清晰检测到。

3、单分子成像与定量：每个荧光点就代表一个RNA分子。通过高分辨率荧光显微镜和专用分析软件，可以对细胞或组织切片中的RNA分子进行精准计数和空间定位，实现真正的单细胞、单分子定量。

二、GeneScope产品如何赋能amsFISH实验

absin的GeneScope多色单分子RNA荧光原位杂交产品，将复杂的amsFISH技术流程化、标准化，极大降低了实验门槛，同时保证了结果的可靠性。

双链DNA探针成环扩增放大信号原理图

1.技术优势：精准与高效的结合

GeneScope产品完美体现了amsFISH的技术优势，并在此基础上进行了优化：

• 灵敏度高：可稳定检测低丰度靶标RNA，解决了传统方法对低表达基因“看不见”的难题。
• 高特异性：采用独家探针设计，有效抑制非特异性结合，确保信号真实反映目标RNA的位置。
• 单细胞定量：精准到单个细胞的表达分析，能揭示细胞群体中的异质性。
• 保留形态：在检测RNA的同时，最大程度保留组织和细胞的完整形态，便于解析基因表达的空间分布。

2.工作流程：从定制到分析的一站式服务

GeneScope的工作流程清晰高效，仅需5个核心步骤：

• 定制探针：根据您提供的物种、基因名称和序列信息，免费设计并合成探针。
• 样本前处理：对组织切片或细胞样本进行固定、通透化等预处理。
• 探针杂交与滚环扩增：将探针与样本孵育，然后进行滚环扩增以放大信号。
• 原位成像：使用荧光显微镜进行成像。
• 图片分析：通过软件对荧光点进行计数和分析。

值得一提的是，整个流程仅需恒温培养箱、漩涡混匀仪和掌上离心机等常规仪器，无需昂贵的杂交炉，大大降低了实验室的设备投入。

3.产品订购与配套试剂盒（详情见下方海报）

GeneScope提供了灵活的订购方案和完善的配套试剂盒，满足不同实验需求：

• 灵活定制：一次实验可同时检测1-4种RNA（包括mRNA、lncRNA、circRNA等），探针定制仅需7个工作日。
• 配套试剂盒：absin提供了从1个靶标到4个靶标的完整检测试剂盒（货号abs60728-abs60731），包含了样本前处理、反应体系、靶标修复等所有必要组分，并赠送阴阳对照探针，开箱即用。

三、应用场景：从发育生物学到肿瘤研究

amsFISH技术，特别是GeneScope这样的高效工具，已在多个前沿研究领域大放异彩：

• 发育生物学：在发育生物学研究中，单分子 RNA 荧光原位杂交技术是破解胚胎发育时空调控密码的关键工具，它能在完整组织中精准定位 RNA 分子、解析细胞异质性。
• 神经科学：例如下方图示在脑组织冰冻切片中定位检测的两个基因，Gad1（红色）是谷氨酸脱氢酶1，在分子层和部分颗粒层细胞中表达量较高；Calb1（绿色）是钙结合蛋白1，主要存在于浦肯野细胞层中，在分子层低表达的则是浦肯野氏细胞的轴突。

• 肿瘤研究：在肿瘤微环境中分析不同细胞亚群的基因表达，揭示肿瘤异质性和耐药机制。
• 病毒学：检测和定位病毒RNA在宿主细胞中的复制位点和传播路径。

Absin产品线：

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