MitoSOX Red 在线粒体超氧化物检测中的应用技术解析

MitoSOX Red 又称线粒体超氧化物指示剂、Mito-hydroethidine（Mito-HE），是靶向活细胞线粒体的膜通透性荧光探针，货号包含 abs823610-20-200T、abs823610-100-1000T，为氧化应激相关研究提供了可靠的检测工具。

一、MitoSOX Red 的核心特性是什么？

该探针可自由穿透细胞膜，进入细胞后定向富集于线粒体内部。它仅对超氧化物产生氧化反应，不受其他活性氧、活性氮干扰。氧化后的探针会结合线粒体与细胞核内核酸，释放稳定的红色荧光。其荧光检测存在两组激发 / 发射参数，396 nm/610 nm 激发模式对线粒体超氧化物检测选择性更强，也可采用 510 nm 激发进行常规检测。试剂以 5 mM DMSO 储备液形式储存，-80 ℃可保存 6 个月，-20 ℃建议 1 个月内使用，工作液需现配现用。

二、MitoSOX Red主要适用于哪些研究场景？

MitoSOX Red 核心用途为定量与定位检测线粒体超氧化物，是氧化应激研究的核心试剂。基于荧光信号强度，可直观反映线粒体活性氧水平，评估线粒体功能状态。凭借高特异性，它可区分超氧化物与其他氧化物质，规避检测干扰，适用于活细胞动态观测与定量分析两类实验方向。

三、常规实验如何使用MitoSOX Red？

1、制备MitoSOX Red染色液

（1）本品以5mM DMSO储备液的形式提供。建议在首次使用前离心产品，可等分试样后用氮气填充管中，并在-20°C或-80°C的避光下储存。

（2）染料工作液：用合适的缓冲液（如无血清培养基或PBS）稀释储备液，制备浓度为1-10μM的MitoSOX Red工作液。

注：请根据实际情况调整优化工作液浓度，现用现配。

2、显微镜检测：MitoSOX Red的最大激发/发射光为396/610nm。MitoSOX Red 染料也可以在 510nm 处激发。如果 MitoSOX Red 染料在 396nm 而不是 510nm 处激发，则该染料可能对标记线粒体超氧化物更具选择性。

该方法操作简便、灵敏度高，适配多数细胞生物学基础实验。