Recombinant Human PPP3CB蛋白怎么用

1. Human PPP3CB是什么？底物有哪些？

PPP3CB 全称 Protein phosphatase 3 catalytic subunit beta，是钙调神经磷酸酶（calcineurin）的催化亚基 β 型，属 Ca2+ 与钙调素依赖的丝氨酸/苏氨酸磷酸酶，经典底物包括 NFAT 家族转录因子。货号 abs0712611 的 Recombinant Human PPP3CB 蛋白对应 UniProt P16298，覆盖 120 个氨基酸，理论分子量 57 kDa，种属 Human。开展磷酸酶活性实验前，先与 P16298 比对确认区段归属。

2. Recombinant Human PPP3CB蛋白怎么表达纯化？

货号 abs0712611 的 Recombinant Human PPP3CB 蛋白由 HEK293 表达。磷酸酶对构象完整性要求高，哺乳动物细胞表达系统在折叠与翻译后修饰上更贴合体内状态。标签为 N-MBP&C-His，N 端 MBP 提高融合蛋白可溶性，C 端 His 负责镍柱亲和捕获。洗脱后按峰收集，产物以 SDS-PAGE 核对 57 kDa 主带，OD280 定量，随即分装冻存。

3. PPP3CB重组蛋白能做哪些实验？

PPP3CB 重组蛋白的实验用法有六类：磷酸酶活性 assay，用 pNPP 或磷酸化肽段作底物读取去磷酸化速率；Co-IP 验证与调节亚基或钙调素的结合；Western blot 验证抗体特异性；ELISA 包被筛抗血清；SPR/BLI 测互作亲和力；质谱作定量内标。活性实验需外源补充 Ca2+ 与钙调素，缓冲液里不要加 EDTA 一类螯合剂。

4. PPP3CB蛋白怎么用PBS复溶与冻存？

产品页写明的复溶介质是 Phosphate buffered saline。冻干粉开盖前先离心，把粉末收拢到管底，再按目标浓度加入 PBS，室温静置数分钟，轻吹助溶，不涡旋。溶解后按单次用量分装，-20℃ 冻存，标注效期 12 months，并写明 Avoid repeated freeze-thaw cycles。做酶活实验时尤其要一次性取样，反复冻融会让比活悄悄下降。

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