重组牛源肠激酶(Enterokinase, Bovine)

2021-09-02

1.产品简介

肠激酶(Enterokinase，EK)属于丝氨酸蛋白水解酶家族，是1条重链和1条轻链组成的异源二聚体。肠激酶广泛存在于哺乳动物十二指肠，能够特异识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys（DDDDK）序列，并水解Lys C端肽键，将胰蛋白酶原活化为胰蛋白酶，从而启动各种酶原活化的级联反映。肠激酶的催化亚基是分子量为27kD的轻链，有3个糖基化位点，糖基化修饰后的蛋白分子量约为40kDa（还原条件）。重组肠激酶轻链体外具有全酶的酶切特异性，可以在较宽的pH范围（4.5-9.5）和较宽的温度范围内有效切割融合蛋白，去除融合蛋白N端标签。

本产品系由巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）重组表达的牛源肠激酶轻链，并在C端融合了由多个组氨酸构成的标签，经多步层析纯化后过滤除菌、分装制成。

2.产品特性

产品特性	属性值
酶活	2.5 IU/μL
分子量	40 kDa(还原状态)
内毒	＜0.2 EU/μg(凝胶法)
产品纯度	＞90% SDS-PAGE(还原状态)
性状	液体
储存buffer	20mM Tris-HCl, pH7.2, 200mM NaCl, 2mM CaCl, 50% Glycerol
表达系统	Pichia pastoris

3.使用方法

根据下表设置反应体系，可按比例放大。

成分	50μL体系
10X 酶切Buffer*	5μL
融合蛋白	50μg
EK	0.5-1μL
超纯水	补齐至50μL

*10X 酶切Buffer中含有20mM CaCl2，可能会降低目的蛋白溶解度，产生蛋白沉淀。如果发生这种现象，可以不加10X酶切Buffer，适当提高酶量、延长反应时间。

4.酶活定义: 25℃反应16小时，完全酶切50μg融合蛋白所需的酶量定义为1 IU；

5.保存条件: -80℃到-20℃可存储12个月。

6检测结果——酶活分析

酶切50μg融合蛋白底物，酶切样品中肠激酶的添加量分别是0.5IU、1IU、1.5IU、2IU。底物为融合蛋白，分子量10kD，25℃反应16小时条件下，酶切后产生8.4kD的目的条带。

货号	产品名称	规格
abs9485	重组牛源肠激酶	250IU

Absin特色产品线(全部现货)：
WB相关：ECL发光液、预染marker、预制胶；IHC相关：二抗试剂盒、组化笔；IP/CoIP试剂盒；激动剂/抑制剂；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡试剂盒；呼吸爆发试剂盒；ELISA试剂盒；重组蛋白；抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体；定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...