CCK-8 试剂盒常见问题解答（一）

2022-09-09

1、CCK-8的是什么颜色？

答：CCK-8正常颜色为粉红色，若颜色发生明显偏差，质量可能有发生变化。

2、CCK-8的细胞毒性如何？

答：CCK-8毒性非常低，因此CCK-8检测完后相同的细胞还能用于其它细胞增殖检测如结晶紫染色法，中性红染色法或DNA荧光染色法。

3、CCK-8能否检测细菌细胞？

答：可以检测E.coli，但不能检测酵母细胞。向100 μl E.coli培养液中加入10 μl CCK-8溶液，并培养1-4个小时或过夜。但是更推荐使用我公司货号M439的：细菌活性检测试剂盒。

4、CCK-8对于不同的细胞，灵敏度是否一样？

答：不一样，悬浮细胞与贴壁细胞相比较难染色。对于贴壁细胞，一般加入CCK-8培养1-4小时吸光度已经很高，但对于悬浮细胞则可能吸光度较低，可以通过延长CCK-8的加入时间或增加细胞数量来解决。

5、能否用384孔板进行细胞增殖与活性检测的实验呢？

答：可以，CCK-8产品的使用量为每孔培养基总体积的10%。建议先将CCK-8产品稀释一倍，然后加入培养基总体积的20%即可，这样可减少误差。

6、CCK-8会对活细胞进行染色吗？

答：不会，首先WST-8不会进入细胞染色，整个显色反应都是在培养体系中进行的。另外WST和WST-8甲臜都属于高度水溶性组分，反应结束更换新的培养液，即可清除外源组分。

7、做细胞活性检测时，每孔应该接种多少个细胞？

答：当使用标准96孔板时，贴壁细胞的最小接种量至少为1,000个/孔(100 μL培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2,500个/孔(100 μL培养基)。

8、若是使用6孔或者24孔板进行试验，CCK-8试剂使用量怎么样呢？

答：如果要使用6孔板或24孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。

9、培养基的本底颜色如酚红会不会影响细胞活性的检测呢？

答：不会的，培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光值而消去，因此不会对检测造成影响。

10、在加入CCK-8时可否不更换培养基？

答：一般情况下可以不更换培养基。但是如果培养基里有氧化还原性物质的话，有可能会产生误差，必须更换其它培养基。

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