实时定量PCR技术(real-time PCR)也叫qPCR(Quantitave PCR),是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过特定数学原理对未知模板进行定量分析的方法。它是一项临床上非常成熟的技术,目前在分子生物学领域,qPCR核酸定量的首选方法。目前仍在全球肆虐的新型冠状病毒鉴定的“金标准”——核酸检测就是通过qPCR原理进行的。
图1 qPCR技术原理简图(图片来自henrik's lab)
那么拿到一个样本,需要经过以下多项操作流程才能定量检测到它的核酸含量。其中任何一个步骤操作失误都会导致它的检测结果出现异常,那让小爱来带您来看下出现常见问题的解答,为您解决qPCR实验中的痛点!
图2 qPCR实验操作流程图
FAQ:
1、无Ct值出现
除了实验操作的解答外,爱必信拥有全套qPCR解决方案来一站式帮您解决qPCR实验难题。
类别 |
货号 |
产品名称 |
规格 |
样本保存 |
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RNA样品保存液 |
100mL |
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RNA保护因子 |
50T |
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RNA提取纯化 |
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Trizol(总RNA抽提试剂) |
100mL |
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组织/细胞RNA快速提取试剂盒(Dnase I) |
50T |
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病毒基因组DNA/RNA快速提取试剂盒 |
50T |
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植物RNA快速提取试剂盒(DNase Ⅰ) |
50T |
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全血RNA快速提取试剂盒(Dnase I) |
50T |
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逆转录 |
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Reverse Transcriptase |
10000U/10000U×5 |
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Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (gDNA Purge) |
50T/100T |
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逆转录一管化三代预混液 |
100T |
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qPCR |
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一步法超级多重荧光定量PCR试剂盒(探针) |
100T/250T |
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一步法超级荧光定量PCR试剂盒(探针) |
100T/250T | |
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Multiplex Probe One Step qRT-PCR Kit |
100T/500T |
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SYBR High-Sensitivity qPCR SuperMix |
1mL×5/1mL×25 |
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SYBR qPCR SuperMix Plus(High ROX Premixed) |
1 mL×5/1mL×25 |
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SYBR qPCR SuperMix Plus(Low ROX Premixed) |
1 mL×5/1mL×25 |
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抗体染料法定量PCR预混液(通用ROX) |
5×1mL |
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abs60303 |
染料法荧光定量PCR试剂盒(化学修饰) |
100T/200T/500T |
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abs60304 |
染料法荧光定量PCR试剂盒(抗体修饰) |
100T/200T/500T |
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abs60305 |
探针法荧光定量PCR试剂盒 |
100T/200T/500T |
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abs60306 |
UDG探针法荧光定量PCR试剂盒(防污染系统) |
100T/200T/500T |
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超级多重荧光定量PCR试剂盒(探针) |
100T/200T/500T | |
abs60308 |
UDG多重探针法荧光定量PCR试剂盒(防污染系统) |
100T/200T/500T |