1、类器官收集
收集生长至较大尺寸类器官:96孔板,生长密度较大时,使用移液枪取半孔以上,清洗1至3遍,洗去大部分基质胶,离心沉淀,弃除大部分上清。
2、琼脂糖固定槽制备(可一次制备一批,温密闭保存)
1)称量0.2至0.4g琼脂糖,加入至烧杯或者小试剂瓶内;
2)加入10mL左右PBS;
3)微波炉高火融化,每隔5s暂停打开,观察,重复数次至琼脂糖融化完全;
4)取约200uL融化琼脂糖,加入至600uL EP管内;
5)在盛有琼脂糖的小EP管内插入一小PCR管,使琼脂糖形成一圆尖底凹槽,室温或者4℃冰箱静置数分钟,至琼脂糖凝固,轻轻转动小PCR管,取出PCR管,可看到琼脂糖内形成一个深圆尖底槽。
3、类器官固定
1)将类器官轻轻吸出转移至一固定槽底部;
2)轻轻加入PBS至高于琼脂糖槽的边缘;
3)盖上盖子,水平离心机1000 rpm,离心5min;
4)轻轻吸出除底部类器官沉淀外的PBS上清;
5)加入融化的琼脂糖液体200μL;
6)室温静置至琼脂糖完全凝固;
7)剪去固定管的底部和盖子,置于2 mL EP管内,加入多聚甲醛至差不多装满整个EP管,置于4℃冰箱过夜。
4、类器官包埋
1)脱水:取出已凝固的含有类器官沉淀的琼脂糖块,在梯度乙醇中脱水,70%、80%、90%、95%乙醇各1h,100%乙醇30min,待其凝固。
2)融蜡:提前4h左右打开烘箱,65℃溶蜡。
3)透明:将脱水完成后的琼脂糖块转移至组织包埋盒中(二甲苯处理前需一直浸泡在无水乙醇中),将包埋盒转移至二甲苯中5min处理两次。
注:因二甲苯有毒性,需在通风良好区域进行操作,取出时尽量沥尽残留二甲苯。
4)浸蜡:透明化处理完成后立即转入已经融化的蜡缸中,60℃浸蜡2h后,更换新的蜡缸再次浸蜡2h。
5)包埋:包埋在冰盒上进行,将融好的纯蜡倒入蜡盒三分之一处,将琼脂块放置于中间位置,然后再滴蜡包埋直到倒满。待蜡块完全凝固后,小心脱下模具。
货号 |
品名 |
规格 |
abs9514 |
Organotial小鼠肠类器官培养基试剂盒 |
1kit |
abs9516 |
Organotial小鼠肝类器官培养基试剂盒 |
1kit |
abs9515 |
Organotial小鼠肺类器官培养基试剂盒 |
1kit |
abs9517 |
Organotial小鼠胰腺类器官培养基试剂盒 |
1kit |
abs9446 |
Organotial乳腺癌类器官培养基试剂盒 |
1kit |
abs9448 |
Organotial子宫内膜癌类器官培养基试剂盒 |
1kit |
abs9445 |
Organotial结直肠癌类器官培养基试剂盒 |
1kit |
abs9444 |
Organotial肝癌类器官培养基试剂盒 |
1kit |
abs9443 |
Organotial肺癌类器官培养基试剂盒 |
1kit |
abs9449 |
Organotial胃癌类器官培养基试剂盒 |
1kit |
abs9447 |
Organotial胰腺癌类器官培养基试剂盒 |
1kit |
类器官试剂盒配套基质胶推荐:
货号 |
品名 |
规格 |
abs9495 |
基质胶(低因子、无酚红) |
1.5ml*8 |
类器官相关服务推荐:
服务内容 |
组织处理;样本活性检测分析;培养体系分析测试 |
类器官构建;培养状态检测 |
|
类器官HE染色鉴定 |
|
肿瘤类器官构建类型 |
肠癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、子宫内膜癌、结直肠癌、宫颈癌、胆管癌、胃癌 |
正常组织类器官(人/鼠)构建类型 |
小肠、结直肠、肝脏、胰腺、肺 |
个性化服务 |
如猪、牛、羊等其他类器官构建服务可额外咨询 |
类器官平台搭建服务推荐:
平台类别 |
服务内容 |
类器官样本库构建 |
类器官原代+传代+冻存+复苏+鉴定实验指导 |
类器官样本库构建指导(样本库一般至少需要200例) |
|
新技术新方法升级指导 |
|
药物测试平台搭建 |
常规药敏平台搭建(小分子药物、化药等) |
免疫共培养平台搭建 |
|
精准医学平台搭建 |
临床样本类器官培养指导及用药指导 |
针对不同药物靶点药敏实验方案指导 |
|
in vitro to vivo平台搭建 |
PDX模型构建 |