mRNA合成全流程产品解决方案

2023-06-12

新型冠状病毒感染（coronavirus disease 2019，COVID-19）疫情暴发以来，各个国家采取了多种控制措施，但仍造成了大量的感染和死亡病例。世界卫生组织（World Health Organization，WHO）统计数据显示，截至2023年2月3日，全球COVID-19累计确诊病例7.54亿例，死亡病例达到681万例。目前，虽然我国已经解除对COVID-19采取的甲类传染病管控措施，但是新型冠状病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2，新冠病毒）仍然在变异，重复感染的风险仍然存在。疫苗接种和抗病毒药物的使用是控制传染病的有效手段。而疫苗被认为是全球战胜新型冠状病毒疫情的最终希望。

自COVID-19疫情爆发以来，灭活疫苗、重组蛋白亚单位疫苗、病毒载体疫苗、DNA载体疫苗和mRNA疫苗等五大技术路线的过百个疫苗研发项目在全球紧急启动。mRNA疫苗相比于其他类型的疫苗，具有安全性高、生产成本低、生产周期短，能更好满足全球疫情对疫苗剂量的迫切需求以及易于开发针对变异病毒株新疫苗等优势，已在全球掀起了研发高潮。据不完全统计，我国大约有16款mRNA新冠疫苗在研。疫情退去，后续上市的疫苗还能获得多大的商业化价值尚未可知，但布局mRNA疫苗是一个入场mRNA疗法这一新兴领域的重要步骤。

mRNA疫苗/药物的工作机制清晰，经由脂质纳米颗粒包裹的mRNA进入体内后被细胞所摄取，纳米脂质颗粒在胞内解开后释放出mRNA，随后利用体内的氨基酸进行自然的蛋白翻译，从而发挥其药物/疫苗功能。mRNA的体外合成制备、保持稳定性和细胞内递送是mRNA药物/疫苗研发的关键技术。

图1 mRNA疫苗/药物原理

其中合成LNP包裹的mRNA流程大致经过模板制备、体外转录、纯化和载体包裹等环节：

图2 LNP-mRNA合成流程

图3 mRNA合成产品总览（酶法加帽法）

一、模板制备：

货号	产品名称	规格
	重组高热稳定DNA 聚合酶	1000U
	dNTP Mix (25 mM each)	250ul
	2×Taq PCR Mix	1ml*50
	2× Xerox PCR Master Mix	1ml×5
	2×Pfu Master Mix	1ml×5
	2×Pfu Master Mix（Quick Load）	1ml×5
	T4 DNA Ligase	500U×10
	快速多片段DNA组装预混液	50T
	无内毒素高纯度质粒大量快速提取试剂盒	10T
	无内毒素高纯度质粒小量快速提取试剂盒	50T

二、体外转录：

分类	货号	产品名称	规格
酶产品		T7 RNA 聚合酶	1000KU
		无机焦磷酸酶	100KU
		脱氧核糖核酸酶Ⅰ（DNase Ⅰ）	10000U
		重组表达的鼠源RNase抑制剂	10000U
		RNA酶抑制剂	40000U
核苷酸原料		ATP Sodium salt solution（100 mM）	1ml×3
		CTP Sodium salt solution（100 mM）	1ml×3
		GTP Sodium salt solution（100 mM）	1ml×3
		UTP Sodium salt solution（100mM）	1ml×3
修饰碱基		假尿苷三磷酸四钠盐溶液	1ml
		N1-甲基-假尿苷三磷酸四钠盐溶液	1ml
		5-甲基-CTP钠盐溶液	1ml
		5-甲氧基-UTP钠盐溶液	1ml
		假尿苷三磷酸四锂盐溶液	50ul
		N1-甲基-假尿苷三磷酸四锂盐溶液	50ul
		N6-甲基-ATP锂盐溶液	50ul
		5-甲基-CTP锂盐溶液	50ul
		5-甲氧基-UTP锂盐溶液	50ul

三、RNA加帽（酶法加帽法）

分类	货号	产品名称	规格
酶产品		T7 RNA 聚合酶	1000KU
		2 氧甲基转移酶	50000U
		牛痘病毒加帽酶	10000KU
合成帽结构		Abs Cap AG	100ul
		Abs Cap GG	100ul
		Abs Cap AU	100ul
		Abs Cap m6AG	10ul
		Abs Cap2 AG	10ul
		Abs Cap2 m6AG	10ul
		体内天然帽结构类似物组合	1kit

四、RNA纯化及检测

分类	货号	产品名称	规格
RNA纯化		无酶无菌水（DEPC水）	500ml
		Oligo(dT)18磁珠（1um）	1ml
		羧基磁珠（1um）	10ml
双链RNA 检测		双链RNA（dsRNA）ELISA检测试剂盒（K1）	96T

五、mRNA相关其他产品推荐

货号	产品名称	规格	产品特征
	Cas9 mRNA	100ug×10	新鲜现货
	Cas9 nickase mRNA	100ug×10	新鲜现货
	EGFP mRNA	100ug×10	新鲜现货
	Fluc mRNA	100ug×10	新鲜现货
	mcherry mRNA	100ug×10	新鲜现货
	EBFP mRNA	100ug×10	新鲜现货
	ECFP mRNA	100ug×10	新鲜现货
	mBanana mRNA	100ug×10	新鲜现货
	mHoneydew mRNA	100ug×10	新鲜现货
	mKate mRNA	100ug×10	新鲜现货
	mOrange mRNA	100ug×10	新鲜现货
	mPlum mRNA	100ug×10	新鲜现货
	mtangerine mRNA	100ug×10	新鲜现货
	tdTomato mRNA	100ug×10	新鲜现货
	YFP mRNA	100ug×10	新鲜现货
	Cre mRNA	100ug×10	新鲜现货
	EPO mRNA	100ug×10	新鲜现货
	OVA mRNA	100ug×10	新鲜现货
	β-gal mRNA	100ug×10	新鲜现货
	Endless eGFP mRNA	50ug	新鲜现货
	Endless Fluc mRNA	50ug	新鲜现货
	Endless mcherry mRNA	50ug	新鲜现货
	Endless Cas9 mRNA	50ug	新鲜现货
	Endless EPO mRNA	50ug	新鲜现货
备注：所有工具RNA均使用 Cap AG结构共转录加帽，修饰碱基5种可任选其一（5-Methoxy-UTP，5-Methyl-CTP，N1-Methylpseudo-UTP，N6-Methyl-ATP，Pseudo-UTP。）

Absin特色产品线：

WB相关：ECL发光液、预染marker、预制胶；IHC相关：二抗试剂盒、组化笔；IP/CoIP试剂盒；激动剂/抑制剂；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡试剂盒；呼吸爆发试剂盒；ELISA试剂盒；重组蛋白；抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体；定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...

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