mRNA转染专用利器，让mRNA转染不再难！

2023-08-04

mRNA（信使RNA）转染是一种将外源mRNA引入细胞内的技术，以实现特定蛋白质的表达或基因治疗的方法。mRNA转染可以绕过基因组中的DNA转录和核糖体转录过程，直接将所需的mRNA传递到细胞内，从而实现蛋白质的合成。

使用mRNA转染技术有多种优势：

1）相比于DNA转染，mRNA转染不需要经过核转录和DNA复制等步骤，可以更快速地实现蛋白质的合成；
2）由于mRNA转染不涉及基因组的改变，避免了可能引发的不良基因突变和免疫应答等问题；
3）mRNA转染还具有可调控性强、转染效率高以及适用范围广等优点。

在实际应用中，mRNA转染被广泛用于基因治疗、疫苗研发以及细胞工程等领域。mRNA转染试剂（）是爱必信推出的专为真核细胞进行mRNA转染开发的mRNA专用转染试剂，可用于在多种贴壁细胞或悬浮细胞中递送mRNA。可直接将mRNA从细胞外传递到细胞质中进行表达，这避免了转录调控作用的影响以及进入细胞核的限制，可被广泛应用于短期蛋白表达的相关研究工作。

产品亮点：

? 专用于mRNA转染，可用于多种贴壁细胞或悬浮细胞；
? 在各种常规细胞、难转的原代细胞或干细胞中均具有较高的转染效率；
? 不受血清影响，转染前后无需更换培养基；
? 产品性能稳定，毒性低，操作简单，重复性好。

实验操作步骤：

以24孔板为例：

1）细胞接种：每孔接种0.5-1.0×10⁵个细胞，细胞培养12-24小时，使转染时细胞密度达到60-70%融合度；
2）mRNA稀释：将mRNA稀释于Opti-MEM培养基中，终浓度0.1mg/mL；
3）复合物制备：取2uL的mRNA转染试剂原液加入到8uL Opti-MEM培养基中，取4uL浓度为0.1mg/mL的mRNA加入到6uL Opti-MEM培养基中，两者等体积混合；
4）室温静置10分钟；
5）无需等待，每孔20uL复合物加入细胞培养板中，混匀，37℃培养18-48小时后检测基因表达，无需更换培养基。

实验案例展示：

1、适用范围广泛：使用Abisn mRNA转染试剂（）在不同类型细胞包括293T细胞、B16F10细胞、MCF-7细胞、LX2细胞、MC38细胞、LLC细胞、MDA-MB-231细胞、Jurkat细胞中转染EGFP mRNA，处理细胞24h后利用荧光显微镜拍照，发现Abisn mRNA转染试剂（）在各类细胞中均取得了较好的转染效果。

图1 mRNA转染试剂（abs60339）转染EGFP mRNA至各种类型类细胞

2、转染效率高：使用Abisn mRNA转染试剂（）和不同竞品mRNA转染试剂在B16F10细胞中转染EGFP mRNA，处理细胞24h后，利用流式细胞仪检测EGFP mRNA的转染效率。结果表明不同比例的Abisn mRNA转染试剂（）转染效率均高于竞品转染试剂。

图2 mRNA转染试剂（abs60339）不用转染试剂转染效率对比结果

备注：图例中不同柱子颜色代表转染试剂和mRNA的比例[转染试剂体积（μL）:mRNA的质量（μg）]，纵坐标的数值代表转染效率。

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备注：所有线性工具RNA均使用 Cap AG结构共转录加帽，修饰碱基5种可任选其一（5-Methoxy-UTP，5-Methyl-CTP，N1-Methylpseudo-UTP，N6-Methyl-ATP，Pseudo-UTP。）

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