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基质胶的“怪脾气”?带你一起了解

2023-12-01

大家都知道基质胶用途广泛,无论在成瘤、成管、干细胞包被,还是类器官培养中,都需要基质胶这个得力助手。但基质胶也是有“怪脾气”的,稍有懈怠,它就凝给我们看,还死倔死倔地“不干活”嘞,所以咱们聊一聊基质胶有哪些“怪脾气”!

 

1、融化时间非常短,对高温过度“敏感”

 

有小伙伴,是把基质胶放在冰盒上融化的,冰盒是放在超净台上的,发现过了半小时基质胶凝了。是的,为啥呢?

 

基质胶如果不是全部插在冰里,一半暴露在空气中,其融化时间很短,通常在冰上不超过30min就完全液化了,尤其是在炎热的夏天,暴露在空气中的一半很快会因为温度过高而凝固掉,所以,基质胶最好的融化方法是在4℃冰箱过夜融化

 

2、当基质胶不小心凝固后,当天是不愿意再“干活”嘞

 

当我们不小心让基质胶凝固了以后,采用冰水化合物降温,采用4℃静置2h,采用-20℃静置10min,都无法“换醒”基质胶,它就静静凝在那里“无动于衷”。是的,这就是基质胶的“怪脾气”,“不搭理”人了。正确做法是先放-20℃,让它进入“冬眠”2h,然后放在4℃过夜融化,等第二天它就“流动”起来了,因为它“消气”着实慢呀。

 

3、基质胶能反复冻融吗?用不完咋办?

 

基质胶反复冻融,流动性会变差,用不完可以分装到EP管冻存,为了减少反复冻融,我们推出的基质胶1.5mL 4(abs9495)支装的,每次用时,取出一支4℃过夜融化。如果一支用不完,可以放在4℃保存1个月,依然保持很好的流动性。

 

4、基质胶融化完或使用时发现有气泡咋办?

 

基质胶本身富含多种蛋白,粘滞性大,出现“吐气泡”现象的原因主要是流动性变差。如果出现气泡,使用时可以用桌面离心机2000r离1min,可有效去除小气泡。

 

5、培养类器官时,怎样避免基质胶很快凝固?

 

采用金属冰盒,效果更好,点胶前,将冰盒,枪头,离心管,EP管放-20℃预冷1h以上,也就是和基质胶接触的东西(除孔板外)都进行充分预冷,可以有效避免基质胶凝固。

 

6、类器官传代时,基质胶和细胞团分不开咋办?

 

首先咱们可以采取一些有效的措施促进两者分离:

1)加入适量(10-14mL)缓冲液,稀释基质胶类器官混合物,能促进分离;

2)将基质胶类器官混合物放于-20℃,5min,加速基质胶液化,能促进分离;或者4℃静置40min促进基质胶液化;

3)离心机的选择非常重要,水平角离心机相比固定角离心机更利于基质胶和类器官分离;

4)离心机的温度最好是4℃(可避免基质胶固化),离心转速可适当提高(最高不要超过500g),离心时间可适当加长(最常不超过10min)。

 

其次如果采取了上述措施,基质胶还是存在少量残留怎么办?

不要慌,如下图所示,可以看到基质胶和细胞团混在一起(基质胶里的白点为细胞团)。此时,我们可以摒弃掉上层缓冲液及基质胶的上1/3,保留下2/3基质胶细胞团混悬物,并加新胶,混合点板。


 

7、基质胶用途多多,不同基质胶有不同用途,如下表:

 

货号

品名

规格

应用

abs9490

基质胶(标准型,含酚红)

1.5mL×4/1.5mL×8

类器官培养;细胞侵袭;细胞迁移

abs9491

基质胶(标准型,无酚红)

1.5mL×8

abs9492

基质胶(高浓度,含酚红)

1.5mL×8

小鼠皮下成瘤;血管生成;凝胶栓塞

abs9493

基质胶(高浓度,无酚红)

1.5mL×4/1.5mL×8

abs9494

基质胶(低因子,含酚红)

1.5mL×4/1.5mL×8

类器官培养;与生长因子、信号途径等相关的研究

abs9495

基质胶(低因子,无酚红)

1.5mL×4/1.5mL×8

abs9497

基质胶(高浓度,低因子,含酚红)

1.5mL×8

小鼠皮下成瘤;血管生成;凝胶栓塞;与生长因子、信号途径等相关的研究

abs9498

基质胶(高浓度,低因子,无酚红)

1.5mL×8

abs9496

基质胶(IPS验证无酚红)

1.5mL×4

包被孔板,适用于人胚胎干细胞hES、诱导多能干细胞IPS 的扩增和维持

abs9410

即用型基质胶

100mL

包被孔板,适用于难贴壁细胞(如293T,HUVEC)的扩增和维持

 

今天讲解就到这了,大家如有实验问题,欢迎入群交流哦!


 

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货号

品名

规格

abs9495

基质胶(低因子、无酚红)

1.5ml*4/1.5ml*8

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1kit

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WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;激动剂/抑制剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒;呼吸爆发试剂盒;ELISA试剂盒;重组蛋白;抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体;定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...

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