大家都知道基质胶用途广泛,无论在成瘤、成管、干细胞包被,还是类器官培养中,都需要基质胶这个得力助手。但基质胶也是有“怪脾气”的,稍有懈怠,它就凝给我们看,还死倔死倔地“不干活”嘞,所以咱们聊一聊基质胶有哪些“怪脾气”!
1、融化时间非常短,对高温过度“敏感”
有小伙伴,是把基质胶放在冰盒上融化的,冰盒是放在超净台上的,发现过了半小时基质胶凝了。是的,为啥呢?
基质胶如果不是全部插在冰里,一半暴露在空气中,其融化时间很短,通常在冰上不超过30min就完全液化了,尤其是在炎热的夏天,暴露在空气中的一半很快会因为温度过高而凝固掉,所以,基质胶最好的融化方法是在4℃冰箱过夜融化。
2、当基质胶不小心凝固后,当天是不愿意再“干活”嘞
当我们不小心让基质胶凝固了以后,采用冰水化合物降温,采用4℃静置2h,采用-20℃静置10min,都无法“换醒”基质胶,它就静静凝在那里“无动于衷”。是的,这就是基质胶的“怪脾气”,“不搭理”人了。正确做法是先放-20℃,让它进入“冬眠”2h,然后放在4℃过夜融化,等第二天它就“流动”起来了,因为它“消气”着实慢呀。
3、基质胶能反复冻融吗?用不完咋办?
基质胶反复冻融,流动性会变差,用不完可以分装到EP管冻存,为了减少反复冻融,我们推出的基质胶1.5mL 4(abs9495)支装的,每次用时,取出一支4℃过夜融化。如果一支用不完,可以放在4℃保存1个月,依然保持很好的流动性。
4、基质胶融化完或使用时发现有气泡咋办?
基质胶本身富含多种蛋白,粘滞性大,出现“吐气泡”现象的原因主要是流动性变差。如果出现气泡,使用时可以用桌面离心机2000r离1min,可有效去除小气泡。
5、培养类器官时,怎样避免基质胶很快凝固?
采用金属冰盒,效果更好,点胶前,将冰盒,枪头,离心管,EP管放-20℃预冷1h以上,也就是和基质胶接触的东西(除孔板外)都进行充分预冷,可以有效避免基质胶凝固。
6、类器官传代时,基质胶和细胞团分不开咋办?
首先咱们可以采取一些有效的措施促进两者分离:
1)加入适量(10-14mL)缓冲液,稀释基质胶类器官混合物,能促进分离;
2)将基质胶类器官混合物放于-20℃,5min,加速基质胶液化,能促进分离;或者4℃静置40min促进基质胶液化;
3)离心机的选择非常重要,水平角离心机相比固定角离心机更利于基质胶和类器官分离;
4)离心机的温度最好是4℃(可避免基质胶固化),离心转速可适当提高(最高不要超过500g),离心时间可适当加长(最常不超过10min)。
其次如果采取了上述措施,基质胶还是存在少量残留怎么办?
不要慌,如下图所示,可以看到基质胶和细胞团混在一起(基质胶里的白点为细胞团)。此时,我们可以摒弃掉上层缓冲液及基质胶的上1/3,保留下2/3基质胶细胞团混悬物,并加新胶,混合点板。
7、基质胶用途多多,不同基质胶有不同用途,如下表:
货号 |
品名 |
规格 |
应用 |
abs9490 |
基质胶(标准型,含酚红) |
1.5mL×4/1.5mL×8 |
类器官培养;细胞侵袭;细胞迁移 |
abs9491 |
基质胶(标准型,无酚红) |
1.5mL×8 |
|
abs9492 |
基质胶(高浓度,含酚红) |
1.5mL×8 |
小鼠皮下成瘤;血管生成;凝胶栓塞 |
abs9493 |
基质胶(高浓度,无酚红) |
1.5mL×4/1.5mL×8 |
|
abs9494 |
基质胶(低因子,含酚红) |
1.5mL×4/1.5mL×8 |
类器官培养;与生长因子、信号途径等相关的研究 |
abs9495 |
基质胶(低因子,无酚红) |
1.5mL×4/1.5mL×8 |
|
abs9497 |
基质胶(高浓度,低因子,含酚红) |
1.5mL×8 |
小鼠皮下成瘤;血管生成;凝胶栓塞;与生长因子、信号途径等相关的研究 |
abs9498 |
基质胶(高浓度,低因子,无酚红) |
1.5mL×8 |
|
abs9496 |
基质胶(IPS验证无酚红) |
1.5mL×4 |
包被孔板,适用于人胚胎干细胞hES、诱导多能干细胞IPS 的扩增和维持 |
abs9410 |
即用型基质胶 |
100mL |
包被孔板,适用于难贴壁细胞(如293T,HUVEC)的扩增和维持 |
今天讲解就到这了,大家如有实验问题,欢迎入群交流哦!
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货号 |
品名 |
规格 |
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基质胶(低因子、无酚红) |
1.5ml*4/1.5ml*8 |
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爱必信(上海)生物科技有限公司 联系邮箱:info@absin.cn 微信公众号:爱必信生物 |
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