透析胎牛血清在这些研究领域“大显身手”

众所周知，胎牛血清是细胞培养界的“香饽饽”，备受胞胞们的“宠爱”，其实还有一个“香煎饼”，大家可知道？对一些细胞的特殊实验研究，透析胎牛血清可谓是散发着一股“煎饼的清香”。

透析胎牛血清(abs945)

透析法处理血清是去除了分子质量小于10kDa的小分子，避免外源小分子对细胞产生干扰。10kDa以下的小分子有化学小分子、核苷酸、某些激素、盐、低分子量蛋白质、氨基酸、细胞因子、葡萄糖、残留抗生素和其他外源分子等。适合脉冲示踪实验（例如同位素标记特定小分子，并加入到培养体系中，以研究细胞代谢），也适合转染CHO后的筛选等应用。是研究蛋白质组学、同位素标记、细胞信号传导和报告基因分析、报告基因细胞系筛选的绝佳工具，接下来我们了解一下具体应用。

1、小分子标记实验

该实验是将用同位素标记的小分子如核苷酸掺入到培养基中培养细胞，来标记细胞内新合成的DNA，一般培养一段时间，细胞中的DNA将都被同位素标记，然后进行DNA提取，纯化等实验分析。为避免胎牛血清中天然核苷酸的干扰，这时就需要用到透析胎牛血清，以保证掺入细胞DNA中的核苷酸均为标记核苷酸。

小分子标记实验示例

2、阳性转染细胞克隆的筛选

一些有基因缺陷的细胞株如CHO-DFGRˉ，缺乏二氢叶酸还原酶(DHFR)，必须在添加了次黄嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸的培养液中才能存活。可将我们想要表达的目的基因和DHFR基因构建质粒，然后转染细胞，用不含上述添加剂的培养基进行培养。未转入重组质粒的缺陷细胞会凋亡；成功转入重组质粒的细胞会存活下来，形成细胞克隆。为避免胎牛血清中次黄嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸的干扰，这时就需要用到透析胎牛血清，以保证完全培养液中不含次黄嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸。

阳性转染细胞克隆的筛选示例

3、细胞平台药物筛选

细胞水平药物筛选是更接近生理条件的一种药物筛选模型，其模型是拟设计药物作用的靶细胞，应用细胞培养技术获取所需细胞，将这些细胞与候选化合物相互作用，通过与生化水平筛选类似的检测技术测定化合物的作用能力，从而对化合物进行筛选。在药物筛选过程中，未避免外源性的小分子对实验的干扰，就需要用到透析胎牛血清。

细胞平台药物筛选示例

本期讲解就到这里了，如有细胞培养问题，欢迎一起交流。

注：文中部分图源网络

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