ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,酶联免疫吸附测定)是一种基于抗原-抗体特异性结合的免疫学检测技术,利用酶标记的抗体或抗原,通过酶催化的显色反应检测目标分子(如蛋白质、抗体、激素等)的存在和含量。
基本原理:
1、抗原-抗体特异性结合:利用抗体识别特定抗原,或抗原结合特定抗体。可以分为直接法、间接法、夹心法、竞争法;
2、酶标记和显色反应:结合特定酶(如辣根过氧化物酶HRP或碱性磷酸酶AP),通过底物反应产生可检测的颜色变化;
3、定量分析:通过比色法测定光吸收值,与标准曲线比较,计算待测物的浓度。
检测激素的ELISA试剂盒类型
检测原理 |
适用激素类型 |
激素名字 |
双抗体夹心法 |
大分子肽类/蛋白质激素 |
Insulin(胰岛素)、GH(生长激素)、TSH(促甲状腺素)、FSH(促卵泡素)、LH(促黄体生成素) |
竞争法 |
小分子激素(类固醇) |
T(睾酮)、E2(雌二醇)、PROG(孕酮)、MT(褪黑素)、 PGF2α(前列腺素) |
样本处理:
血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或 4℃过夜,然后 1000×g离心 20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
血浆:用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于 2-8℃1000×g离心 15 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃℃保存,但应避免反复冻融。
组织匀浆:用预冷的 PBS (0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织碎。将碎的组织与对应体积的 PBS(一般按 1:9 的重量体积比,比如 1g 的组织样品对应 9mL 的 PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在 PBS 中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于 5000×g离心 5~10 分钟,取上清检测。
细胞裂解液:贴壁细胞用预冷 PBS 轻轻清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 离心 5 分钟后收集细胞;悬浮细胞可直接离心收集。收集的细胞用预冷PBS 清洗 3 次,每 1×10^6 个细胞中加入 150-200uL PBS 重悬(推荐在PBS 中加入蛋白酶抑制剂;若含量很低可适当减少 PBS 体积)并通过反复冻融或超声使细胞破碎。将提取液于 2-8℃,1500×g 离心 10 分钟,取上清检测。
细胞培养上清:请 1000×g离心 20 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
其它生物液体:1000xg离心 20分钟,取上清即可检测。
ELISA试剂盒特点:
1、可测样本类型多:血清、血浆、组织、细胞培养上清等样本;
2、高准确度:回收率普遍在90%-115%之间;
3、高灵敏度:灵敏度达pg级别,R2大于99。
产品推荐清单
货号 |
名称 |
样本类型 |
规格 |
abs551029 |
Human FSH ELISA Kit |
细胞上清液,血清,血浆 |
96T |
abs551134 |
Human GC ELISA Kit |
细胞上清液,血清,血浆,组织匀浆,尿液,唾液,其他生物样品 |
96T |
abs551009 |
Human Growth Hormone ELISA Kit |
细胞上清液,血清,血浆 |
96T |
abs551113 |
Human Leptin ELISA Kit |
细胞上清液,血清,血浆 |
96T |
abs551028 |
Human LH ELISA Kit |
细胞上清液,血清,血浆 |
96T |
abs551031 |
Human TPO ELISA Kit |
细胞上清液,血清,血浆 |
96T |
abs552209 |
Mouse Leptin ELISA Kit |
细胞上清液,血清,血浆 |
96T |
abs553008 |
Rat LH ELISA Kit |
血清,血浆,组织匀浆,细胞培养上清,尿液,唾液,其他生物液体 |
96T |
abs554114 |
Monkey INS ELISA Kit |
细胞上清液,血清,血浆,组织匀浆,细胞裂解液,其他生物样品 |
96T |
abs554111 |
PROG ELISA Kit |
细胞上清液,血清,血浆,组织匀浆,其他生物样品 |
96T |
abs554113 |
E2 ELISA Kit |
细胞上清液,血清,血浆,组织匀浆,其他生物样品 |
96T |
abs554112 |
T ELISA Kit |
细胞上清液,血清,血浆,组织匀浆,其他生物样品 |
96T |
abs554160 |
PGF2α ELISA Kit |
血清、血浆 和 其他生物液体 |
96T |
Absin产品线:
爆款产品:十大试剂盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化检测、残留检测、多因子检测);细胞培养(类器官试剂盒+基质胶,胎牛血清+培养添加剂+细胞因子)、分化试剂盒;分子(mRNA合成服务+提取试剂盒);化合物大包装;辅助试剂、耗材/仪器、定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...
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