支原体是实验室中常见的污染细胞的原核生物,污染主要来源包括细胞和毒种,以及血清、鸡胚、原代细胞等动物性原材料和操作者本身,数据显示,约有 15%-35%的细胞存在支原体污染。支原体会改变宿主细胞的结构和功能等一系列特征,造成实验结果不准确;干扰细胞代谢和生长,改变核酸合成,影响细胞抗原性,导致染色体改变,干扰病毒复制以及模仿病毒的作用。因此,检测并去除支原体,对细胞培养非常重要,可以说要想细胞养得好,支原体去除不可少。
去除细胞支原体污染,面临的第一个挑战就是如何检测细胞中可能存在的支原体污染。支原体是一类无细胞壁、直径约 0.1-0.3 μm 的原核微生物,常规的革兰氏染色无效,光学显微镜下难以观察。而且,部分支原体(如口腔支原体)可与宿主细胞建立潜伏感染,不引起明显细胞病变,难以察觉。
经典的检测支原体的方法是培养法及指示细胞法,但两种方法耗时太久,且培养条件相对较为苛刻,在过程中易受污染,造成检测结果偏差。基于生命科学的发展,目前已有一些更为高效和准确的方法来替代传统方法。依据《欧洲药典》中<2.6.7>中指出,在适当的验证之后,核酸扩增技术NAT可以代替培养法和指示细胞培养法。NAT法灵敏度高,耗时也相对较短。基于支原体特异性激酶的表达情况的生化检测法,则耗时更短,在20-30min内即可完成对支原体的检测,灵敏度也接近NAT法,更适合于对支原体污染进行快速检测判断。
培养法 |
指示细胞法 |
NAT(核酸扩增技术) |
生化法 |
|
时间 |
28 天 |
4-5 天 |
2-5 小时 |
20 分钟 |
灵敏度 |
10 cfu/mL |
100 cfu/mL |
10 cfu/mL |
50 cfu/mL |
特异性 |
没有单一方法的特异性能达到 100%,通常用两种方法组合以提高特异性 |
表1:常用的支原体检测方法对比
爱必信针对支原体检测,推出两款快速检测产品,分别基于NAT和激酶生化检测技术,半小时内即可完成检测,灵敏度高达10 cfu/mL,助力快速检测支原体污染。
abs90062 一步法快速支原体检测试剂盒(等温扩增法),利用等温扩增技术与可视化颜色变化能够快速检测细胞培养液中常见的 8 种支原体。30 min内搞定检测,无需仪器。
产品特点:
1、等温扩增技术,灵敏度高;
2、操作简单,无需PCR仪及开盖电泳;
3、实验快速,30 min即可完成实验;
4、无需检测仪器,结果可视化;
abs90283 MYCO-LTM 荧光素酶支原体检测试剂盒,可特异性的检测活支原体产生的真核细胞不表达的激酶,这些激酶可以将 ADP 转化为 ATP。能够30 min内快速检测包括常见的8种和其他多种常见活支原体。
产品特点:
1、生物发光检测,灵敏度高;
2、操作简单,均相反应,两次读数;
3、实验快速,30 min即可完成实验;
4、信噪比高,媲美进口Lon**品牌;
其他支原体检测产品
货号 |
品名 |
规格 |
原理特点 |
abs90062 |
一步法快速支原体检测试剂盒(等温扩增法) |
50T |
等温扩增,30min快检,无需PCR仪,可视结果。 |
abs90283 |
MYCO-LTM 荧光素酶支原体检测试剂盒 |
10 & 25 & 50T |
支原体激酶发光法,灵敏度接近NAT法,20min快检。 |
abs90199 |
发光法支原体检测试剂盒 |
20 & 200T |
支原体激酶发光法,30 min完成实验。 |
abs9252 |
支原体染色检测试剂盒 |
100T |
Hoechst染色检测,形态观测 |
abs9588 |
支原体检测试剂盒(PCR法) |
50T |
NAT法PCR检测,需电泳 |
abs9925 |
支原体检测试剂盒(qPCR法) |
50T |
NAT法,qPCR检测,Taqman 探针,qPCR仪实时读数 |
abs90284 |
MYCO-T?巢式PCR支原体检测试剂盒 |
25 & 50T |
NAT法,巢式PCR,两步扩增,灵敏度更高,需电泳 |
除检测试剂外,爱必信还提供全套支原体预防及清除试剂,助力远离支原体困扰
货号 |
品名 |
规格 |
特点 |
abs9253 |
支原体清除试剂 |
20mg/100mg |
多肽类,无抗药性 |
abs9254 |
支原体清除试剂Plus |
10mg |
天然抗生素,可预防可清除 |
abs9376 |
支原体预防剂 |
500uL/500uLx4 |
多肽类,无抗药性 |
abs9843 |
清除支原体喷剂 |
280mL |
多肽类,5-10min可根除 |
爱必信其他常用热卖细胞培养污染清除产品
货号 |
品名 |
规格 |
abs9244 |
青霉素-链霉素溶液(100x,双抗) |
100mL |
abs9245 |
青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液(100x,三抗) |
100mL |
abs9246 |
青霉素-链霉素-两性霉素B混合溶液(100x,三抗) |
100mL |
abs42018967 |
硫酸庆大霉素溶液 |
10mL |
abs9596 |
青霉素G钠盐溶液(100x) |
100mL |
abs9593 |
两性霉素B溶液(10mg/mL) |
10mL |
abs9594 |
制霉菌素溶液(10mg/mL) |
10mL |
abs9595 |
盐酸环丙沙星溶液(20mg/mL) |
10mL |
abs9841 |
黑胶虫清除剂PLUS(500x) |
400uLx5 |
abs9842 |
黑胶虫预防剂(1000x) |
500uLx5 |
abs9371 |
水浴锅抑菌剂 |
100mL |
abs9372 |
培养箱除菌剂 |
480mL |
abs9373 |
细胞房除菌剂 |
480mL |
abs9374 |
水盘抑菌剂 |
20mL |
支原体污染防控需贯穿 “检测 - 清除 - 预防” 全流程
定期检测:对珍贵细胞株建议每传代一次进行 NAT 或生化法检测;
应急处理:发现污染后立即使用 abs9253 等清除试剂,配合传代离心法降低支原体载量;
环境管控:使用专用消毒剂定期处理培养箱、超净台,血清等耗材需严格质检。
通过专业化的检测产品与标准化操作流程,可有效构建细胞培养的支原体防护屏障,保障科研实验的稳定性与可靠性。
Absin产品线:
爆款产品:十大试剂盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化检测、残留检测、多因子检测);细胞培养(类器官试剂盒+基质胶,胎牛血清+培养添加剂+细胞因子)、分化试剂盒;分子(mRNA合成服务+提取试剂盒);化合物大包装;辅助试剂、耗材/仪器、定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...
特色产品:鸡胚提取物CEE、B27、N2、霍乱毒素B亚单位CTB、牛脑垂体提取物BPE、百日咳毒素PTX、重组人胰岛素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...
爱必信(上海)生物科技有限公司 联系邮箱:info@absin.cn 微信公众号:爱必信生物 |
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