产地 | 上海 |
品牌 | 爱必信(absin) |
货号 | abs9117 |
保存条件 | -20℃ |
用途范围 | Western blot |
规格 | 100ml |
保质期 | 12个月 |
是否进口 | 否 |
产品描述 | |||||||||||||
描述 |
SDS,也称十二烷基硫酸钠(Sodium Dodecyl Sulfate),是一种常见的阴离子去垢剂,常用于变性蛋白。SDS 裂解液(SDS Lysis Buffer)是一种比较强烈的细胞组织裂解液,主要成分为50mM Tris-HCl(pH 8.1),1% SDS 以及焦磷酸钠,甘油磷酸钠、正钒酸钠,氟化钠,EDTA 和抑肽酶等多种抑制剂,可广谱且有效抑制蛋白降解,经本品裂解所得的蛋白样品,适用于常规的蛋白免疫印迹(Western Blot),染色质免疫共沉淀(ChIP)等实验。
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外观 |
溶液
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使用方法 |
1、培养的细胞样品: 【裂解液用量说明】:通常 6 孔板每孔细胞加入 150μl 裂解液已经足够,如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到 200uμl 或 250ul。如果用于 ChIP,建议 6 孔板每孔细胞至少加入 200ul 裂解液。
(1)将组织剪切成细小的碎片。 (2)充分融解 SDS 裂解液,之后混匀。取适当量的裂解液,使用前数分钟内加入 PMSF(100mM),使其最终浓度为 1mM。 (3)按照每 20mg 组织加入 150-250ul 裂解液的比例加量。 【注意:如果裂解不充分可以适当添加用量,如果需要高浓度的蛋白样品,可适当降低用量。】 (4)用玻璃匀浆器匀浆直至充分裂解,此过程尽量控制在 1-2 分钟内,以减少蛋白的降解。如果提取的蛋白样品用于 ChIP,应置于冰上或 4℃继续裂解 10-20min。 (5)充分裂解后,10,000-14,000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的 PAGE、WB 和 ChIP 等实验。 (6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过高强度的漩涡混匀器使样品裂解充分,之后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解的足够充分。 |
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注意事项 |
1、为取得较好的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2、裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。 3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
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基本信息 | |||||||||||||
储存/保存方法 |
-20℃,有效期12个月。
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