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产品描述:

产品名称:Rat TNF-α ELISA Kit

描述:

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗大鼠 TNF-α抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的TNF-α与固相抗体和检测抗体结合,形成免疫复合物。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物,避光显色。加入终止液终止反应,在450 nm波长(参考校正波长540nm或570nm)测定吸光度值。

检测类型:双抗夹心法

形式:预包被96孔板

检测样本类型:细胞上清液,血清,血浆

上样量:100ul

试剂盒组分:

预包被96孔板、标准品、抗大鼠 TNF-α检测抗体、稀释用缓冲液、显色液(A、B)、洗涤液、终止液、SA-HRP、封板膜和说明书一份。

灵敏度:7.8 pg/mL

检测范围:62.5 - 4,000 pg/mL

回收率范围:75-112%

保存方法:2-8℃

标准曲线图

背景:

α(TNF-alpha),也称为cachectin和TNFSF1A,是TNF超家族的原型配体。它是一种多效性分子,在,发育,细胞凋亡和脂质代谢中起着核心作用。 TNF-α还涉及许多病理状况,包括,克罗恩氏病,,神经性,,,败血性休克,自身免疫性疾病和。

大鼠TNF-α是26 kDa II型跨膜蛋白,该蛋白由35个氨基酸(aa)的胞质结构域,21 个aa的跨膜片段和156个 aa胞外结构域(ECD)组成。在ECD中,大鼠TNF-α与小鼠的氨基酸序列同一性为95%,与牛,犬,棉鼠,马,猫,人,猕猴和猪的TNF-α氨基酸序列的同一性为73%-79%。它由多种免疫细胞,上皮细胞,内皮细胞和细胞产生。 TNF-α在细胞内组装以形成在细胞表面表达的非共价连接的同型三聚体。细胞表面TNF-α既可以诱导细胞和病毒感染的细胞裂解,又可以通过可溶性TNF RI连接后产生其自身的下游细胞信号传导。 TACE / ADAM17释放结合在膜上的TNF-α释放出生物活性细胞因子,它是TNF-α细胞外域的55 kDa可溶性三聚体。

 TNF-α与无处不在的55-60 kDa TNF RI和造血细胞受限的78-80 kDa TNF RII结合,两者也均表示为同源三聚体。 I型和II型受体都以相当的亲和力结合TNF-α,并且可以促进NFκB活化。然而,仅TNF RI含有细胞质死亡结构域,该结构域触发细胞凋亡的激活。两种类型的受体的可溶性形式都释放到人的血清和尿液中,并且可以中和TNF-α的生物活性。

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