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One-Step RT-PCR Kit
  • 品牌:爱必信(absin)
  • 产地:上海
  • 货号:abs60074"
  • 发布日期: 2021-06-09
  • 更新日期: 2025-03-28
产品详请
产地 上海
品牌 爱必信(absin)
货号 abs60074
包装规格 200次
纯度 %
是否进口






公告提醒:爱必信所有产品和服务仅用于科学研究,不用于及其他用途提供产品和服务(也不为任何个人提供产品和服务)!

 

产品描述:

产品名称:One-Step RT-PCR Kit

描述:

One-Step RT-PCR Kit一步法RT-PCR试剂盒具有方便、快速、灵敏度高、重复性好等特点。该试剂盒能以动物、植物和微生物的总RNA或mRNA为模板,cDNA合成和PCR反应在一个管中进行,反转录结束后可直接进行PCR循环而不用增加额外的步骤;同时可对低至1fg的总RNA进行扩增,有助于大量样品的处理并减少污染机会。
产品组分:





















组分 体积
RT Enzyme Mix 200ul
2× One-Step RT-PCR SuperMix 1ml×2 
RNase Free Water  1ml×2 

产品特点:

效率高,可反转录GC含量高,二级结构复杂的RNA模板。

独特的缓冲体系使反转录酶和聚合酶同时发挥最大功效。

操作简单,可最大限度的避免污染。

实验方法:

1、将 RNA 模板、引物、2×One-Step RT-PCR SuperMix,RT Enzyme Mix 和RNase Free Water 溶解并置于冰上备用。
2、配置以下反应体系:




























模板RNA

0.1ng-5ug

RT Enzyme Mix

1ul

2×One-Step RT-PCR SuperMix

10ul

上游引物(10μM)

0.5-1ul

下游引物(10μM)

0.5-1ul

RNase Free Water

至 20ul

3、轻轻混匀后短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
4、常用反应程序:






























42℃

5min/5000bp

95℃

5 分钟

25-30 次循环:

94℃,20 秒

50-60℃,20 秒

72℃,1kb/60 秒

72℃

5 分钟

4℃

保温

储存/保存方法: -20℃

注意事项: 1、本试剂盒PCR扩增延伸时间为1kb/min,客户可根据具体片段长度进行延伸时间的调整。
2、通常情况,28~30个循环可达到最佳扩增,对于低拷贝目的基因的检测,可将循环数增加到40个。
3、如果同时操作多个样品,建议先在冰上先配制预混液,然后再分装到各个反应管中,加入模板启动反应。
4、反应出现目标条带拖带,系模板浓度过高或特异引物浓度不适等原因所致,可对模板及引物浓度等进行调整;反应出现杂带,可对退火温度进行调整,或重新设计特异性高的引物。
5、本试剂盒只需使用特异性反转录引物,无需使用Random Primer和OligodT Primer等进行反转录反应。
6、为了保证反应的正常进行,需使用高质量的RNA模板。

产品信息订购:



















  产品货号   产品名称   规格 价格 大包装及货期
  abs60074   One-Step RT-PCR Kit   200次   1680.00   立即咨询

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