公告提醒:爱必信所有产品和服务仅用于科学研究,不用于及其他用途提供产品和服务(也不为任何个人提供产品和服务)!

产品描述:

产品名称:BJ5183-AD-1感受态细胞

描述: BJ5183-AD-1菌株携带的pAdEasy-1质粒包含了大部分人腺病毒5型的基因组序列(E1/E3基因缺失),表达可供pAdEasy-1骨架质粒和pAdEasy穿梭质粒进行同源重组的所有组分,产生重组腺病毒质粒。pAdEasy-1为33.5kb,具有氨苄青霉素抗性,一旦与穿梭载体重组,其抗性消失。卡那霉素抗性的pAdTrack-CMV质粒检测感受态细胞的转化效率大于10³ cfu/μg。
基因型:
endA1 sbcBC recBC galK met thi-1 bioT hsdR (StrR ) [pAdEasy-1 (AmpR )] 
菌株抗性:
对卡那霉素敏感,有链霉素和氨苄青霉素抗性

使用方法: 质粒转化步骤:1、将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后,加入目的质粒(含有目的基因并线性化)到细 胞中,用手指拨打管底,轻轻混匀;2、冰水浴中放置 30 分钟,不要晃动;3、42℃热击 60 秒钟,不要晃动;4、冰水浴中放置 2 分钟,不要晃动;5、加入 500μl 无菌的 SOC 或 LB 培养基;6、置于 37℃摇床中,150-200rpm 震荡复苏培养 60 分钟;7、取 50-100μl 菌液涂布在含有抗性的 LB 平板上。待液体吸干后,倒置平板,37℃培养 12-16 小时。(平板划线分离法:复苏培养结束后,12000rpm 离心 30 秒钟,弃掉上清,留 100μl 左右的液体,用 200μl 吸头轻轻吹打散菌块,取 10μl 重悬的菌液分多点滴在平板上,倾斜吸头,用吸头头部的侧面将滴在平 板上的液体来回划线。这个方法可以获得更多更大的单克隆菌落。)

储存/保存方法: -70℃保存,避免反复冻融

产品信息订购:

产品更多信息请进入爱必信网站咨询