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产品描述:

产品名称:Turbo 感受态细胞

描述: 本公司生产的Turbo感受态细胞是采用大肠杆菌Turbo菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞。Turbo菌株是生长最快的大肠杆菌菌株,菌株平板上6.5小时可见克隆,摇菌4-6小时可提取质粒。核酸内切酶 (endA1)基因的缺失有利于提高质粒DNA的产量和质量。菌株的LacIq基因的表达受到严格控制,可克隆毒性基因。ΔlacZM15基因的存在可用于蓝白斑筛选。菌株还具有抗T1噬菌体感染的特点。Turbo感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率大于10⁹ cfu/μg DNA。
基因型:
F'proA+B+lacIqΔlacZM15/fhuA2Δ(lac-proAB)glnVgalK16galE15R(zgb-210::Tn10)TetSendA1thi-1Δ(hsdS-mcrB)5
菌株抗性:
对氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、壮观霉素、链霉素、四环素敏感

使用方法: 质粒转化步骤:1、将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后,加入质粒 DNA 或 5-10μl 连接产物到细胞中,用手指拨打管底,轻轻混匀。2、冰水浴中放置 30 分钟,不要晃动。3、42℃热击 60 秒钟,不要晃动。4、冰水浴中放置 2 分钟,不要晃动。5、加入 500μl 的室温的 SOC 或 LB 培养基。6、置于 37℃摇床中,150-200rpm 震荡复苏培养 60 分钟。 7、取 50-100μl 菌液涂布在含有抗性的 LB 平板上。待液体吸干后,倒置平板,37℃过夜培养。 平板划线分离法:复苏培养结束后,12000rpm 离心 30 秒钟,弃掉上清,留 100μl 左右的液体,用 200μl 吸头轻轻吹打散菌块,取 10μl 重悬的菌液分多点滴在平板上,倾斜吸头,用吸头头部的侧面将滴在平板上的液体来回划线。这个方法可以获得更大的单克隆菌落。此方法主要适用于质粒转化,连接产物转化最好用涂布法。质粒快速转化步骤:对于氨苄青霉素抗性的质粒,将步骤 2 的时间缩短到 5 分钟,完成步骤 4 后,可直接涂布或划线于含氨苄青霉素抗性的 LB 平板上。其它抗性的质粒仍需 60 分钟的复苏培养。

储存/保存方法: -70℃保存,避免反复冻融

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