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产品描述:

产品名称:T-Vector快速克隆试剂盒

描述: 本产品是高效、便利的PCR产物克隆专用试剂盒。T Simple载体是基于pBlueScript II SK(+) 质粒,通过对其多克隆位点区序列进行改造,去除了多克隆位点,再经酶切处理后获得的具有突出的3’-末端T碱基的线性载体。T Simple载体不含绝大多数常用的限制性内切酶位点以及重组表达常用的NdeI和NcoI等位点,因而更适合用于含酶切位点的PCR产物的插入。该载体可与Taq 或Tth 等DNA聚合酶催化的携带3· -端A碱基的PCR产物互补连接,以利于下一步克隆或测序。由Pfu、Pwo 或KOD等高保真DNA聚合酶催化反应的PCR产物,也可经Taq DNA聚合酶添加3· -端A碱基后,与T Simple Vector连接。DNA测序建议使用M13 Forward和M13 Reverse,T7promoter和T3 promoter 通用引物。 本试剂盒提供预混有T4 DNA连接酶和2x Ligation Buffer 25℃下5分钟完成连接反应。试剂盒还提供一800 bp PCR产物(Control Insert)作为连接反应的阳性对照。用本试剂盒克隆约1 kb大小PCR片段的蓝斑率(即自连率)通常低于5%,白斑插入阳性率可高达90%以上。受载体自身大小的限制,2.5 kb以上PCR产物的克隆阳性率低于30%。
产品特点:
1、阳性率高:高纯度酶切型线性T载体,连接效率更高,蓝斑率低于10% 。
2、方便快捷:预混连接反应体系,最快5分钟实现连接,无需纯化,直接转化。
3、T Simple载体无常用酶切位点,利于含酶切位点基因克隆。
4、无NdeI或NcoI位点,便于重组表达基因的克隆。
5、提供纯化的PCR片段作为阳性质控对照 。
6、 蓝白筛选:高表达活性的β-半乳糖苷酶,显色更快更深 。
7、批次稳定:遵循标准化生产流程,经过严格的质量检测。
产品信息:

储存/保存方法: -20℃恒温保存,保质期12个月。避免反复冻融,单次用量少时应适量分装

技术指标: 质量控制:
插入DNA对照与载体连接的摩尔比例为3:1时,蓝斑率低于5%,有90%以上的白色菌落含插入DNA对照片段。经测序确认多克隆酶切位点及T碱基存在。

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