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产品描述:

产品名称:磁珠法PCR产物回收试剂盒

别名: MagBeads PCR Product Extraction Kit

描述: 产品简介:

    本试剂盒提供了一种快速、简便、高效的PCR产物回收方法。可以直接从各种PCR产物以及含有DNA核酸的溶液中回收100bp及以上的DNA片段,回收率高达85%以上,同时有效去除引物二聚体、dNTP、无机盐及蛋白质等杂质,操作快速简单:20分钟即可完成整个操作流程,无需离心。

    本试剂盒经结合液结合、磁珠吸附DNA片段、漂洗以及洗脱等步骤后,可得到纯度优良的核酸产物,所得产物可直接用于测序、酶切、PCR等下游分子生物学实验,回收的PCR产物纯度高,A260/280=1.7~1.9,A260/230=1.9~2.3。 

    本试剂盒可手动法配合EP管进行少量样本操作;手动法配合96孔圆孔板和专用96位磁板架实现高通量操作,单人可同时操作1~6块96孔板,同步进行96~576份PCR产物样本回收工作;亦可配合自动化核酸提取仪实现自动化工作。 

试剂盒组分:

使用方法: 1. 准备

真空干燥箱稳定到55℃;涡旋混合仪的振动频率设定为1000rpm。

向EP管中加入50μL磁珠悬浮液(提前摇晃均匀),将装有磁珠的EP管置于磁力架上静置约15s至磁珠完全吸附,弃去磁珠保存液。
1倍Magnetic Beads可以去除~100bp片段,建议处理引物二聚体比较严重的样品。
2倍可以回收100bp的片段。若回收更小片段 DNA,加入3~5倍Magnetic Beads。

3. 加入样品

向EP管中加入待纯化的PCR样品,涡旋混匀5min。

向装有磁珠的EP管中加入结合液。当样本体积小于34μL时,加入100μL结合液;当样本体积大于34μL时,加入3倍体积结合液。

将EP管置于磁力架上静置约15s至磁珠吸附完全。如EP管内盖有磁珠残液,保持EP管于磁力架上,整体颠倒两次使磁珠吸附完全,然后彻底吸弃上清液,期间避免接触磁珠。

向EP管中加入500μL清洗液(使用前需按标签提示加入对应体积乙醇),涡旋震荡1min,然后参考步骤5进行磁性分离,弃尽上清液。(该步骤操作2次)

保持EP管于磁力架上,置于55℃烘箱中干燥8min。

取出EP管,加入50μL洗脱液(根据自己所需目的核酸浓度决定用量,洗脱液提前60℃水浴中预热可以提高洗脱效率),用移液器吹打3min(或涡旋振荡3min)使磁珠与洗脱液充分混匀。  

将EP管置于磁力架上静置15s至磁珠吸附完全,用移液器将洗脱液转移至另一干净EP管中得DNA回收产物,此时可弃去磁珠。

储存/保存方法: 试剂盒内的Magnetic Beads置于2-8℃保存,其余试剂室温保存

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