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产品描述:

产品名称:Mouse IL-12 p70 ELISA Kit

中文别名: CLMF p35; Cytotoxic lymphocyte maturation factor 35 kDa subunit; IL12 p70; IL-12 p70; IL-12 subunit p35; IL-12, subunit p35; interleukin 12, p35; interleukin 12A (natural killer cell stimulatory factor 1, cytotoxic lymphocytematuration factor 1, p35); interleukin-12 alpha chain; interleukin-12 subunit alpha; natural killer cell stimulatory factor 1, 35 kD subunit; NF cell stimulatory factor chain 1; NK cell stimulatory factor chain 1; NKSF1; p35

描述:

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗小鼠 IL-12 p70抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的 IL-12 p70与固相抗体和检测抗体结合,形成免疫复合物。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物,避光显色。加入终止液终止反应,在450 nm波长(参考校正波长540nm或570nm)测定吸光度值。

检测类型:双抗夹心法

形式:预包被96孔板

检测样本类型:细胞上清液,血清,血浆

上样量:100ul

试剂盒组分:

预包被96孔板、标准品、抗小鼠 IL-12 p70检测抗体、稀释用缓冲液、显色液(A、B)、洗涤液、终止液、SA-HRP、封板膜和说明书一份。

灵敏度:2.24 pg/mL

检测范围:39.1 - 2,500 pg/mL

回收率范围:83-107%

保存方法:2-8℃

标准曲线图

背景:

白细胞介素 12(IL-12, 也称 NKSF), 是 70-75kDa 的异源二聚体糖蛋白, 属于 IL-12异源二聚体细胞因子家族。 IL-12 由 35 kDa(p35)和 40 kDa(p40) 的两个亚基构成,这两个亚基由二硫键相连, 相互间无氨基酸序列同源性。 成熟的 p35 亚基有 196 个氨基酸, 包含七个半胱氨酸及一个潜在的 N-连接糖基化位点。 成熟的小鼠 p35 与人和大鼠的氨基酸同源性分别为 63%和 86%。 成熟的小鼠 p40 亚基长 313个氨基酸, 包括 13 个半胱氨酸和 5 个潜在的 N-连接糖基化位点。 有研究报道 p40 序列具有多态性, 但 R&D systems 的这个 IL-12 p70 试剂盒不识别这些等位基因产物。

成熟的小鼠 p40 和人及大鼠的氨基酸同源性分别为 72%和 93%。 虽然 p35类似于促红细胞生成素的配体, 但 p40 更类似促红细胞生成素受体的 N-端, 有 WSXWS结构域、 一个免疫球蛋白样结构域和四个保守的半胱氨酸。 这表明 IL-12 可能是细胞因子受体模拟物, 类似于 IL-6/可溶性 IL-6R 复合物。 值得注意的是 p40可以以单体或同源二聚体形式存在, 而 p35 却从来没有发现单体形式。 p40 是白介素 23(IL-23) 两个亚基中较大的亚基。 虽然 IL-12 一直被认为是一种分泌型分子, 人们在人和小鼠细胞中也发现了膜结合型 IL-12。 产生 IL-12 的细胞包括巨噬细胞、 树突状细胞、 单核细胞、 朗格汉斯细胞、 中性粒细胞、角质形成细胞、 类浆树突状细胞、 小胶质细胞、 CD8+ DC(仅小鼠细胞)和非生发中心的(CD38-CD44+) B 细胞(仅人体细胞)。

小鼠 IL-12 的高亲和力受体是由至少 2 个 I 型跨膜糖蛋白组成, 类似于细胞因子受体超家族成员。 第一个亚基(Rβ1) 为 100 kDa, 以 Kd= 1nM 与 IL-12 结合。 这个受体是 p40 亚基的主要结合位点; 第二个亚基(Rβ2) 为 130 kDa, 与 Rβ1亚基无氨基酸同源性。 这个受体是信号转导的重要组成部分, 作为一个二硫键相连的 p30-p40 二聚体的附着点。 如上所述, 小鼠 p40 以单体、 二聚体形式存在, 或于 p35 结合形成 IL-12, 或于 p19 结合形成 IL-23。 同源二聚体 p40 和 IL-23 都可以结合 IL-12R, 作为不传递信号的拮抗剂。 或者 p40同源二聚体也可以与 Rβ1 结合, 激活小胶质细胞和巨噬细胞。从功能上而言, IL-12 已被证明能够增强细胞毒性、 诱导 NK 细胞、 T 细胞和树突状表皮 T 细胞产生γ干扰素。 有报道表明, IL-12 能诱导巨噬细胞产生γ干扰素。 与 IL-23 和 IL-27 等其 IL-12 的家族成员一起, IL-12 能促进 CD4+ Th1 型免疫反应的进展。 作为感染应答, IL-27 最先分泌, 促进 TH0 向 THR0/1 过度,随后分泌 IL-12, 产生 Th1 效应细胞。 与 IL-18、 IL-12 一起产生把效应细胞转化 Th1 记忆细胞, 接着这些细胞被 IL-23 激活。

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