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产品描述:
产品名称:Mayer's 苏木素染液
英文别名: Mayer’S苏木素染液 描述: 苏木素,常用于核染色,从苏木(Haematoxylin campechianun)中分离提取。在1865年,Bohmer用苏木素对生物样本进行染色。在1903年,Mayer改良了配方,随后出现了众多的改良配方。其中,Harris、Gill、Mayer’s和Weigert’s至今仍在使用。苏木素染色之前,苏木素需在金属离子(媒染剂)的作用下,进行氧化。媒染剂是铝或铁盐。 一般来说,根据染料的浓度,苏木素染液分为渐进式或回归式。渐进式染色(如Mayer’s苏木素),染料浓度较低,选择对细胞核进行染色,不对染色质进行染色。如果染色时间过长,渐进式染色与回归式染色的效果相似。长时间的渐进式染色与回归式染色效果相同。回归式染色(如Harris 苏木素染液)可对组织中的成分(核及细胞质)进行强烈染色。要达到正确的色彩,必须去除多余的染料。经过充分的分化,适当的脱色,显示核染色,但染色质结构不染色。 Mayer’s苏木素染液通常用于免疫组织化学和细胞化学染色后的核复染。也可用于标准的苏木素-伊红(HE)染色,但更常用于盐酸乙醇分化,或用乙醇分化,可破坏细胞质的染色。 苏木素染色的最后一步是组织切片的“蓝化”。组织切片染色为紫色或红紫色。在碱性溶液中处理(温自来水[如果微碱性],稀氨水、Scott’s tap water substitute,或碳酸锂),苏木素染色的组织切片的特征为蓝色。 使用方法: 操作流程:
1、用伊红染色复染 1.1 制备95%乙醇:将5ml蒸馏水加入至95ml无水乙醇中;
1.2 脱蜡,冰冻切片固定;
1.3 在Mayer’s 苏木素染液中染色15min;
1.4 温自来水漂洗15min;
1.5 蒸馏水漂洗30sec;
1.6 如果使用醇溶性伊红,在95%乙醇或95%变性酒精中漂洗30sec;
1.7 用Eosin Y复染(醇溶或水溶)复染30~60sec;
1.8 分别用无水乙醇,二甲苯进行脱水、透明2次,每次2min;
1.9 树脂封片。
2、用特定染液复染
2.1 完成染色流程;
2.2 蒸馏水漂洗;
2.3 用Mayer`s 苏木素染液染色1~5min;
2.4 自来水或稀释的碱溶液漂洗,直至细胞核蓝化;
2.5 蒸馏水漂洗;
2.6 如果使用醇溶性染液染色,应用水溶性封片剂。如果使用纯不溶性染液,应用乙醇脱水,二甲苯或二甲苯替代物透明,树脂封片。
染色结果: 细胞核为蓝色,核仁可见。细胞质为粉红色至橙红色(依赖于复染的染液),红细胞为红色。 储存/保存方法: 室温,密封避光,有效期12个月。 注意事项: 1、Mayer`s苏木素染液,每次使用前需要过滤。
2、浸染的时间都是大约的预估时间。根据个人喜好不同,可调整染色时间。反复使用染液,会使其失去染色能力,将导致染色时间应延长,此时应使用新的染液。
3、可用温自来水代替稀碱性溶液。这将缩短染色程序所需的时间。在进行伊红染色之前,如果用稀碱溶液,一定要用自来水再漂洗2~3min。
4、一些自来水是酸性的,不适合用于流程中的“蓝化”实验。如果自来水是酸性的,需使用碱溶液稀释。
5、核为紫色或棕红色,表示“蓝化”不充分。
6、如果伊红染色过度,核染色可被掩盖。为了增加曙红分化,延长醇的时间或使用酒精的含水量较高。醇的时间可调节获得伊红染色的正确程度。
7、使用前需过滤染色。需每天更换乙醇,二甲苯/二甲苯替代物。
8、不推荐将不同批号的苏木素染液或伊红染液混合使用。
9、避免将多余的水,带入Mayer`s 苏木素染液中。
10、每次运行,均需要使用阳性对照。
11、第一次使用本试剂盒时建议先取1~2个样品做预实验。
12、为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,带手套等。
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