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产品描述:

产品名称:多聚D-赖氨酸(分子量:7-15万)

CAS号: 27964-99-4

描述:

 多聚赖氨酸(poly-lysine)是一种带正电荷的氨基酸聚合物,能够结合于 DNA,红细胞膜或任何带负电荷蛋白,是一种非特异性的细胞粘附因子,促进细胞吸附到固相基质上。作用机理在于其可增强细胞膜表面的负电荷离子和固相基质表面(如细胞培养皿,载玻片等)的静电相互作用。当吸附到培养表面后,多聚赖氨酸提高用于细胞结合的阳离子结合位点数。多聚赖氨酸分子量的大小与粘度相关,即分子量较低,粘度较低,使用越容易;分子量较高,粘度较高,提供的粘附位点也较多。分子量>30,000 的聚赖氨酸适用于促进细胞粘附到固体基质。一般实验人员倾向于分子量为 70,000-150,000 的聚赖氨酸,因其在粘度和作用位点上都比较理想。
多聚赖氨酸(poly-lysine)有两种常见亚型,D-和 L-型。由于多聚赖氨酸是细胞结合的非特异性粘附因子,两种亚型都可用作包被固体基质,在细胞培养中都可促进细胞的贴壁生长。据报道多聚 L-赖氨酸能够改善蛋白在 ELISA 培养板上的粘附性。然而细胞应用中,某些细胞能够水解多聚 L-赖氨酸。此种情况必须使用多聚 D-赖氨酸作为粘附因子,从而保护细胞不会因摄取过量 L-赖氨酸而被破坏。
本品为多聚-D-赖氨酸(Poly-D-lysine),分子量为 70,000-150,000,适用于细胞培养。用作细胞培养基质,推荐使用量为:对于 25cm2 的培养板需要 0.1mg/ml 的聚赖氨酸溶液约 0.5ml-1.0ml。本品也能用作组织学分析时的粘片剂。

分子式: (C₆H₁₂N₂O₂)_n.xHBr

外观: 白色固体

分子量: 7-15万

使用方法: 1.储存液准备 将 10mg 粉末溶于 2ml 无菌去离子水中充分溶解后,用 0.2μm 低蛋白吸附的滤膜过滤除菌后,即得到 5mg/ml的 poly-D-lysine 储存液,可直接用于细胞培养用途。为了保持多次使用造成的污染,可将储存液以单次使用量分装到无菌管子内,4℃或者-20℃保存,至少 1 年有效。 2.细胞培养用包被基质 使用多聚 D-赖氨酸进行细胞相关包被实验,需根据不同的细胞系和应用进行包被条件的优化。一般步骤如下: 1)使用无菌组织培养级水或者 PBS 将 5mg/ml poly-D-lysine 储存液稀释到最适合自身实验体系的包被浓度。通常情况下,常用的培养皿/板包被浓度为 0.1mg/ml,即将储存液稀释 50 倍后使用。 2)无菌条件下包被细胞培养板,使用量 0.5ml-1.0ml/25cm2。轻轻摇动板底以使其覆盖整个板面。 3)5min 后,用枪移除培养板表面溶液,并用无菌组织培养级水或者 PBS 清洗板面;【注意】:有的情况需要 1~2 个小时来完成铺板,有的时候需要过夜铺板。依情况而定。 4)至少干燥 2h 后,方可进行细胞培养。 【注意】:如果多聚赖氨酸包被后的玻璃器皿或玻片必须除菌,可用 γ-射线照射(而非高压灭菌)对其进行除菌。 【注意】:如果包被表面不平整,可用 1mM 醋酸镁预处理玻璃载玻片 2-3h,彻底清洗干净后再开始包被。或者,玻璃载玻片用酸清洗(盐酸或硫酸),经此处理能让多聚赖氨酸溶液包被很平整。 3.组织学研究(玻片的包被) 一般推荐 0.1%(w/v)的 poly-D-lysine 溶液用于组织学玻片的制备。将玻片用相应浓度的多聚赖氨酸溶液处理 5min 后,清洗玻片并将其室温过夜干燥或者在约 60℃的烤箱内烘干~1h。【注意】:此工作溶液装在塑料瓶中于 4℃保存,并限制使用次数在 4 次以内。

储存/保存方法: -20℃干燥保存,3年稳定

注意事项: 1) 在某些细胞培养应用中,一些细胞会消化多聚 L-赖氨酸并吸收,摄入过多的多聚 L-赖氨酸会产生一定的细胞毒性。因此,遇到这种情况建议选用多聚 D-赖氨酸(Poly-D-lysine),如 Poly-D-lysine (Mw70,000-150,000)。 2) 本品以氢溴酸(HBr)的形式提供,每个赖氨酸残基约含一个 HBr。HBr 的存在使得多聚赖氨酸能溶于中性缓冲液,通过透析除去盐离子。 3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

可溶性/溶解性: 溶于水

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