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产品描述:

产品名称:无机焦磷酸酶

参考文献: [1] Cunningham PR, Ofengand J. Use of inorganic pyrophosphatase to improve the yield of in vitro transcription reactions catalyzed by T7 RNA polymerase. Biotechniques. 1990;9(6):713-714. PMID: 1702976 [2] Cooperman BS. The mechanism of action of yeast inorganic pyrophosphatase. Methods Enzymol. 1982;87:526-548. doi:10.1016/s0076-6879(82)87030-4. PMID: 6129562

描述: 本制品为利用大肠杆菌大规模发酵表达的 重组无机焦磷酸酶(酵母来源),可催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐:P₂O₇ ^4-+H₂O+PPase→2HPO₄ ^2- 。这是一个高放能的反应,自然条件下,无机焦磷酸酶可以为蛋白、RNA和DNA的生物合成反应提供热力学动力,并在脂代谢,钙吸收以及骨形成等生物转化过程中发挥作用。该酶在实验应用中能够高效发挥作用,保证反应的进行。在分子生物学中可用于反转录反应中提高RNA产量。
产品特点
1.无机焦磷酸酶是一种金属蛋白酶,达到最大活性需要 Mg²⁺ 的参与;
2. 热稳定性:最佳反应温度为 25 ℃,65 ℃ 10min 可使该酶失活;
3. 反转录反应中提高RNA产量;
4. 增强DNA复制能力。
质量保证
1. SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;
2. 酶动力学实时荧光法显示无RNA酶污染。

来源: 重组E.Coli

分子量: 63 kDa

纯度: ≥95%

活性: 比活:0.1 U/μL

储存/保存方法: -20 ℃以下保存
避免反复冻融或频繁暴露于温度变化中,首次使用时建议进行分装。
产品效期:12个月

产品用途: 1.优化 RNA 转录:提高体外转录反应的 RNA 产量;
2. 优化 PCR 反应:提高效率,增加 DNA 产量;
3. 去除利用焦磷酸盐测定法来进行 SNP 基因分型的试剂中的 PPi 污染物;
4. 促进蛋白质、RNA 和 DNA 的合成;
5. 催化 PPi + H2O→2Pi 的反应;
6. 作为反应缓冲液的组分用于氨酰化的测定,以对掺入tRNA的[3H]L-甲硫氨酸进行定量。

注意事项: 注意事项
1. 使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20 ℃保存;
2. 该酶在多种反应 Buffer 中均具有活性,通常该酶在 HDA、LAMP 等实验中,直接加入即可;
3. 该酶的用量在不同的实验中需要优化,通常在 0.05~1 U/ml 浓度调整;
4. 该酶的最佳反应温度为 25 ℃,其在 16~37℃均有活性,65 ℃ 10min 可使该酶失活;
5. 辅因子:Mg2+对于酶发挥活性是必须的

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