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产品描述:

产品名称:多聚D-赖氨酸,分子量:150,000-300,000

CAS号: 27964-99-4

描述:

    多聚赖氨酸(poly-lysine)是一种带正电荷的氨基酸聚合物,能够结合于DNA,红细胞膜或任何带负电荷蛋白,是一种非特异性的细胞粘附因子,促进细胞吸附到固相基质上。作用机理在于其可增强细胞膜表面的负电荷离子和固相基质表面(如细胞培养皿,载玻片等)的静电相互作用。当吸附到培养表面后,多聚赖氨酸提高用于细胞结合的阳离子结合位点数。多聚赖氨酸分子量的大小与粘度相关,即分子量较低,粘度较低,使用越容易;分子量较高,粘度较高,提供的粘附位点也较多。分子量>30,000 的聚赖氨酸适用于促进细胞粘附到固体基质。
    多聚赖氨酸(poly-lysine)有两种常见亚型,D-和L-型。由于多聚赖氨酸是细胞结合的非特异性粘附因子,两种亚型都可用作包被固体基质,在细胞培养中都可促进细胞的贴壁生长。据报道多聚L-赖氨酸能够改善蛋白在ELISA 培养板上的粘附性。然而细胞应用中,某些细胞能够水解多聚L-赖氨酸。此种情况必须使用多聚D-赖氨酸作为粘附因子,从而保护细胞不会因摄取过量L-赖氨酸而被破坏。本品为无菌的多聚-D-赖氨酸(Poly-D-lysine)溶液,浓度为5mg/ml,分子量为150,000-300,000,可直接稀释后用于细胞或组织培养相关的实验。

分子量: 150,000-300,000 细胞培养级

使用方法: 1. 细胞培养用包被基质
使用多聚D-赖氨酸进行细胞相关包被实验,需根据不同的细胞系和应用进行包被条件的优化。一般步骤如下:
1)使用无菌组织培养级水或者PBS 将5mg/ml poly-D-lysine 储存液稀释到最适合自身实验体系的包被浓度。 通常情况下,常用的培养皿/板包被浓度为0.1mg/ml,即将储存液稀释50 倍后使用。
2)无菌条件下包被细胞培养板,使用量0.5ml-1.0ml/25cm²。轻轻摇动板底以使其覆盖整个板面。
3)5min 后,用枪移除培养板表面溶液,并用无菌组织培养级水或者PBS 清洗板面;【注意】:有的情况需 要1~2h 来完成铺板,有的时候需要过夜铺板。依情况而定。
4)至少干燥2h 后,方可进行细胞培养。 【注意】:如果多聚赖氨酸包被后的玻璃器皿或玻片必须除菌,可用γ-射线照射(而非高压灭菌)对其进行除菌。 【注意】:如果包被表面不平整,可用1mM 醋酸镁预处理玻璃载玻片2-3h,彻底清洗干净后再开始包被。 或者,玻璃载玻片用酸清洗(盐酸或硫酸),经此处理能让多聚赖氨酸溶液包被很平整。

2. 组织学研究(玻片的包被)
使用无菌组织培养级水或者PBS 将5mg/ml poly-D-lysine 储存液稀释到最适合自身实验体系的包被浓度, 一般推荐0.1%(w/v)的poly-D-lysine 溶液用于组织学玻片的制备。 将玻片用相应浓度的多聚赖氨酸溶液处理5min 后,清洗玻片并将其室温过夜干燥或者在约60℃的烤箱内 烘干~1h。【注意】:此工作溶液装在塑料瓶中于4℃保存,并限制使用次数在4 次以内。

储存/保存方法: ?20°C 保存,有效期1年

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