|
公告提醒:爱必信所有产品和服务仅用于科学研究,不用于临床应用及其他用途提供产品和服务(也不为任何个人提供产品和服务)!
产品描述:
产品名称:重组高热稳定DNA 聚合酶
描述: 本品是 94 kDa 的耐热性 DNA 聚 合 酶, 通 过 将 Thermus aquaticus DNA Polymerase 的基因经克隆转化到大肠杆菌中进行表达后,分离提取而得到的,与天然 Taq DNA 聚合酶具有相同的功能。具有 5' → 3' 聚合酶活性和 5' → 3' 外切酶活性,但无 3' → 5' 外切酶活性。PCR 产物的 3' 端带 A,可克隆至 T 载体。
产品组成:
| 组分 | 规格 | | Taq DNA Polymerase(5 U/μl) | 200 μl | | 10×Taq Reaction Buffer | 5×1ml |
技术指标: 质量控制:
核酸内切酶残留检测:
将酶液与超螺旋质粒 DNA 在 37℃ 温育 4 h,通过 DNA 电泳检测质粒无变化。
核酸外切酶残留检测:
将酶液与双链 DNA 底物在 37℃ 温育 16 h,通过 DNA 电泳检测双链 DNA 底物无变化。
宿主残留检测:
将酶液中残留的核酸经 E.coli 16S rDNA 特异性的 TaqMan qPCR 检测,E.coli 基因组残留低于 10 拷贝。
功能检测:
能有效扩增多种基因组中的单拷贝基因。 使用方法: 1、 建议的 qPCR 反应体系:
| 试剂 | 使用量 | 终浓度 | | Taq Plus DNA Polymerase (5 U/μl) | 0.25 μl | 1.25 U/50 μl | | 10×Taq Buffer for PCR | 5 μl | 1× | | dNTP(10 mM) | 1 μl | 0.2 mM | | 正向引物(10 μM) | 1 μl | 0.2 μM | | 反向引物(10 μM) | 1 μl | 0.2 μM | | 模板 DNAa | X μl | | | ddH2O | To 50 μl | |
a、不同模板最佳反应浓度有所不同,以 50 μl 体系为例:模板为基因组 DNA 时,一般使用量应在 10~400 ng;当模板为质粒或病毒 DNA 时,一般使用量应在10 pg~20 ng。
2、常规 PCR 反应程序:
| 步骤 | 温度 | 时间 | | | 预变性 | 94℃ | 3~5 mina | | | 变性 | 94℃ | 30 sec | 30~35 Cycles | | 退火 | 55~65℃ | 30 sec | | 延伸 | 72℃ | 30~60 s/kb | | 终延伸 | 72℃ | 5 min | |
a. 该预变性条件适合绝大多数扩增反应,对于一些复杂模板,例如:菌液、菌落(尤其是酵母)的 PCR 扩增,预变性时间可适当延长至 10 min,以提高预变性效果。
注 :
如果使用酵母菌液作为 PCR 扩增模板,建议目的片段长度不超过 2.5 kb,若超出 2.5 kb, 建议将酵母菌液预先进行破壁处理。 储存/保存方法: -20 ℃保存,有效期24个月。
产品信息订购:
| 产品货号
|
产品名称
|
规格 |
价格 |
大包装及货期 |
| abs60251 |
重组高热稳定DNA 聚合酶 |
1000U |
240.00 |
立即咨询
|
产品更多信息请进入爱必信网站咨询
|
