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试剂描述:

DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。DAPI的激发波长为340nm，发射波长为488nm，DAPI和双链DNA结合后，激发波长为364nm，发射波长为454nm。

产品名称:DAPI染色液

产品别名:DAPI Staining Solution

英文别名:DAPI Staining Solution

浓度:3μM

外观:二甲基甲酰胺溶液

保存方法:-20℃,避光,有效期12个月。

使用方法:

DAPI染色实验流程：

1、贴壁细胞的复染：

1.1样品准备： 使用恰当的固定剂固定样品。一般情况下，结尾用 DAPI 对细胞进行染色。

1.2复染流程：

（1）用 PBS 短暂平衡样品；

（2）加入适量的 DAPI 染液，保证所有细胞均被覆盖,孵育 3~5min；

（3）用 PBS 漂洗样品数次，用吸水纸将多余的液体吸干；

（4）用配有恰当滤片的荧光显微镜观察样品。

2、悬浮细胞的复染：

2.1 样品准备：

（1）收集悬浮细胞 2×105 ~1×106 个细胞，通过离心，使细胞沉淀，弃上清；

（2）轻弹试管，使沉淀在剩余的液体中重悬，在加入 1mL PBS；

（3）将细胞悬液缓慢的加入 4mL 乙醇中，同时以较大的速度涡旋。将含有细胞的乙醇在 -20℃放置5~15min；

（4）通过离心，使细胞沉淀，弃上清；

（5）轻弹试管，使沉淀松散，在加入 5ml PBS。

2.2 复染流程：

（1）离心使细胞沉淀，弃上清，轻弹试管，使沉淀松散，加入 2~3mL DAPI 染液；

（2）室温下孵育 15min；

（3）如果使用荧光显微镜观察细胞，将样品离心后，弃上清，用新鲜的缓冲液重悬沉淀。 在显微镜载片上滴加一滴细胞悬液，加盖片后观察。

注意事项:

1、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。

2、避免反复冻融，否则容易失效。

3、DAPI对人体有刺激性，请注意适当防护。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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