爱必信(上海)生物科技有限公司
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PM原代细胞质粒DNA转染试剂盒
  • 品牌:爱必信(absin)
  • 产地:上海
  • 货号:abs60256
  • 价格: ¥528/瓶
  • 发布日期: 2023-03-24
  • 更新日期: 2024-03-29
产品详请
产地 上海
品牌 爱必信(absin)
货号 abs60256
用途 大鼠肝细胞、血管平滑肌细胞、血管内皮细胞、肺泡上皮细胞、乳腺癌细胞、肺癌细胞、大肠癌细胞、肝癌细胞等
产品规格 0.1ml,0.5ml,1.0ml,1.5ml
纯度 -%
是否进口
描述
产品介绍:
这款产品是在Plasmid DNA Transfection Reagent的基础上进一步优化研发成功的专门用于原代细胞质粒DNA转染的转染试剂。它具有非常好的转染性能,可高效转染多种原代细胞,转染效率高达70%以上(EGFP质粒)。与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同,这款产品采用生物可降解材料配制,对细胞的毒性很低,转染后细胞死亡率不到10%。使用也非常方便,先将转染试剂与质粒DNA混合,再将转染试剂-DNA复合物直接加入培养细胞中,血清不影响其转染效果,不必刻意添加或更换培养液,操作十分简便。

产品特点

1、非常好的细胞转染性能:可高效转染多种原代细胞,转染效率可高达85%以上;
2、 极低的细胞毒性:使用可降解生物材料,细胞毒性低,转染细胞死亡率不到10%,大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响,实验结果更为客观;
3、操作简便,可用于含血清培养基培养细胞的转染,转染前后不需要更换培养液。

使用方法

方法步骤(以24孔板转染为例):

A、细胞接种:
1、转染前24小时左右对细胞进行转接,培养过夜;
2、确保转染时细胞密度为90%左右;

3、在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基,以防转染后孵育 阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。


B、PM /DNA转染复合物制备(该步完成后应立即进行转染):
1、在1.5 ml无菌离心管中加入50μl Trans buffer,再加入适量的转染 试剂,见附表。用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。
2、在1.5 ml无菌离心管中加入50μl Trans buffer,轻轻混匀,再加入适量的DNA,见附表。用移液器再次轻轻 混匀后在室温静置5分钟。
3、将DNA-Trans buffer合物滴加至PM-Trans buffer混合物中,用移液器轻轻混匀后在室温静置15~20分后,立即转染。注意: PM-Trans buffer混合物和DNA-Trans buffer混合物的混合次序非常重要,切勿颠倒。

注意:离心管建议使用聚丙烯离心管。


C、转染:

1、将步骤B制备的转染复合物滴加至培养基中,边加边轻轻晃动培养板以使复合物均匀分布。加完后,立即将培养板转入培养箱继续培养。
2、培养12小时后即可观察,观察或收获时间为24~48小时。
3、PM 在完全培养基中仍有较高的转染效率,因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。如果转染后需要更换新鲜培养基,请于加入PM /DNA复合物12~24小时后进行。


附表:不同培养体系推荐初始转染条件

培养皿 96 孔板 48 孔板 24 孔板 12 孔板 6 孔板 10cm 皿
表面积cm2 0.35 1.0 1.9 3.8 9.6 59
Trans buffer、试剂、DNA 量 Trans buffer(μl) 20 50 100 200 400 2000
PM(μl) 0.5 1.3 2.5 5 10 50
1μg/μl plasmid (μl) 0.16 0.4 0.8 1.6 3.2 16
完全培养基(ml) 0.1 0.25 0.5 1.0 2.0 10


储存/保存方法
-20℃避光保存,Trans buffer 可保存于2-8°C,有效期1年,使用前轻轻混匀。
技术指标
试剂盒包装:
货 号 PM试剂 Trans buffer
abs60256 -0.1ml 0.1ml 4ml
abs60256 -0.5ml 0.5ml 20ml
abs60256 -1.0ml 1.0ml 40ml
abs60256 -1.5ml 1.5ml 60ml

产品用途
大鼠肝细胞、血管平滑肌细胞、血管内皮细胞、肺泡上皮细胞、乳腺癌细胞、肺癌细胞、大肠癌细胞、肝癌细胞等
注意事项
注意: 本产品仅用于科研实验
联系方式
手机:15502157206
电话:021-38015121
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