PM原代细胞质粒DNA转染试剂盒-爱必信（上海）生物科技有限公司

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PM原代细胞质粒DNA转染试剂盒

品牌：爱必信(absin)

产地：上海

货号：abs60256

价格： ￥528/瓶
发布日期： 2023-03-24
更新日期： 2024-12-12

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产地	上海
品牌	爱必信(absin)
货号	abs60256
用途	大鼠肝细胞、血管平滑肌细胞、血管内皮细胞、肺泡上皮细胞、乳腺癌细胞、肺癌细胞、大肠癌细胞、肝癌细胞等
包装规格	0.1ml，0.5ml，1.0ml，1.5ml
纯度	-%
是否进口	否

描述

产品介绍：
这款产品是在Plasmid DNA Transfection Reagent的基础上进一步优化研发成功的专门用于原代细胞质粒DNA转染的转染试剂。它具有非常好的转染性能，可高效转染多种原代细胞，转染效率高达70%以上（EGFP质粒）。与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同，这款产品采用生物可降解材料配制，对细胞的毒性很低，转染后细胞死亡率不到10%。使用也非常方便，先将转染试剂与质粒DNA混合，再将转染试剂-DNA复合物直接加入培养细胞中，血清不影响其转染效果，不必刻意添加或更换培养液，操作十分简便。

产品特点

1、非常好的细胞转染性能：可高效转染多种原代细胞，转染效率可高达85%以上；
2、极低的细胞毒性：使用可降解生物材料，细胞毒性低，转染细胞死亡率不到10%，大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响，实验结果更为客观；
3、操作简便，可用于含血清培养基培养细胞的转染，转染前后不需要更换培养液。

使用方法

方法步骤（以24孔板转染为例）:

A、细胞接种:
1、转染前24小时左右对细胞进行转接，培养过夜；
2、确保转染时细胞密度为90%左右；

3、在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基，以防转染后孵育阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。

B、PM /DNA转染复合物制备(该步完成后应立即进行转染):
1、在1.5 ml无菌离心管中加入50μl Trans buffer，再加入适量的转染试剂，见附表。用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。
2、在1.5 ml无菌离心管中加入50μl Trans buffer，轻轻混匀，再加入适量的DNA，见附表。用移液器再次轻轻混匀后在室温静置5分钟。
3、将DNA-Trans buffer合物滴加至PM-Trans buffer混合物中，用移液器轻轻混匀后在室温静置15~20分后，立即转染。注意： PM-Trans buffer混合物和DNA-Trans buffer混合物的混合次序非常重要，切勿颠倒。

注意：离心管建议使用聚丙烯离心管。

C、转染:

1、将步骤B制备的转染复合物滴加至培养基中，边加边轻轻晃动培养板以使复合物均匀分布。加完后，立即将培养板转入培养箱继续培养。
2、培养12小时后即可观察，观察或收获时间为24~48小时。
3、PM 在完全培养基中仍有较高的转染效率，因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。如果转染后需要更换新鲜培养基，请于加入PM /DNA复合物12~24小时后进行。

附表：不同培养体系推荐初始转染条件

培养皿		96 孔板	48 孔板	24 孔板	12 孔板	6 孔板	10cm 皿
表面积cm2		0.35	1.0	1.9	3.8	9.6	59
Trans buffer、试剂、DNA 量	Trans buffer(μl)	20	50	100	200	400	2000
	PM(μl)	0.5	1.3	2.5	5	10	50
	1μg/μl plasmid (μl)	0.16	0.4	0.8	1.6	3.2	16
完全培养基(ml)		0.1	0.25	0.5	1.0	2.0	10

储存/保存方法

-20℃避光保存，Trans buffer 可保存于2-8°C，有效期1年，使用前轻轻混匀。

技术指标

试剂盒包装：

货号	PM试剂	Trans buffer
abs60256 -0.1ml	0.1ml	4ml
abs60256 -0.5ml	0.5ml	20ml
abs60256 -1.0ml	1.0ml	40ml
abs60256 -1.5ml	1.5ml	60ml

产品用途

大鼠肝细胞、血管平滑肌细胞、血管内皮细胞、肺泡上皮细胞、乳腺癌细胞、肺癌细胞、大肠癌细胞、肝癌细胞等

注意事项

注意：本产品仅用于科研实验