爱必信(上海)生物科技有限公司
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产品展厅
BSA残留检测试剂盒;牛血清白蛋白残留检测试剂盒
  • 品牌:爱必信(absin)
  • 产地:上海
  • 型号:96T
  • 货号:abs590008
  • 价格: ¥4500/盒
  • 发布日期: 2023-07-12
  • 更新日期: 2024-06-14
产品详请
产地 上海
品牌 爱必信(absin)
货号 abs590008
用途 -
规格 96T
是否进口
概述
别名
牛血清白蛋白残留检测试剂盒
描述

此定量检测牛血清白蛋白(BSA)酶联免疫试剂盒,采用抗 BSA 的单克隆配对抗体,分别作为包被抗体和检测抗体,组成双抗体夹心 ELISA 检测试剂盒,并与美国标准局的 BSA标准品为参照标准,本试剂盒min可检测到 1ng/mL 的 BSA。


产品组分:

名称 数量(规格) 保存温度
抗 BSA 单克隆抗体包被的 96 孔板条 1 块 4℃
BSA 标准品:32ng/mL、16ng/mL、8ng/mL、4ng/mL、2ng/mL、1ng/mL、0ng/mL 各 1 瓶
(0.4mL/瓶)
-20℃/-80℃
BSA 内部参比(20ng/mL) 1 瓶
(0.4mL/瓶)
 
TMB 底物显色液: 1 套
(A 和 B 各 6.5mL)
4℃
显色底物终止液(2N,H2SO4) 1 瓶(13mL) 4℃
样品稀释液 1 瓶(13mL) 4℃
洗涤液(10 倍浓缩) 1 瓶(50mL) 4℃
使用说明书 1 份 4℃
酶标记抗 BSA 抗体 1 瓶(0.13mL) -20℃/-80℃
酶标记抗体稀释液 1 瓶(13mL) 4℃

使用方法
一、所需仪器:
酶标仪(波长 450nm,10μL、100μL、1mL移液器,300μL多道移液器,移液器吸头、37℃恒温水浴箱。

二、操作步骤:
1、将浓缩洗涤液用蒸馏水做 10 倍稀释。
2、取出包被有抗 BSA 的 96孔酶标板在室温放置回温。标准品各浓度做平行两孔,50μL/孔加入酶标板中。加待检样品、内部参比,各两孔,50μL/孔。然后将酶标记抗体用酶标抗体稀释液做 1:100 稀释,加入各反应孔,100μL/孔(酶标记抗体用多少稀释多少,现用现配)。加样过程须在 15 分钟内完成。
3、置室温 20~24℃避光反应 1 小时,用洗涤液洗涤四遍,拍干。
4、用移液器加 TMB 底物显色液 100μL/孔,请勿震荡,室温 20~24℃避光反应 10 分钟。
5、用移液器加终止液 100μL/孔,稍微震荡 5s 混匀。
6、在酶标仪 450nm 波长处读数。

三、结果判定:
1、实验有效参数:
实验结果须满足以下有效参数为成立:
0ng/mlOD 值≤0.1; 32ng/mlOD 值≥0.80; 阳性参考 18~22ng/ml; R2≥0.98;
2、计算:
在 EXCEL 里面以标准浓度为横坐标,消零 OD 值为纵坐标作散点图,添加趋势线,再显示曲线方程和R2 值,将检测样品 OD 值消零处理后带入直线方程计算对应的浓度。

标准浓度 OD1 OD2 OD3 平均值 消零 OD
0 0.069 0.062 0.064 0.065 0
1 0.111 0.109 0.113 0.111 0.046
2 0.13 0.127 0.131 0.129 0.064
4 0.191 0.192 0.193 0.192 0.127
8 0.332 0.319 0.327 0.326 0.261
16 0.583 0.588 0.596 0.589 0.524
32 1.039 1.025 1.054 1.039 0.974


3、判定:
在标准曲线中,设 OD0~16ng/mL 为区间 A;OD16~32ng/mL 为区间 B;大于 OD32 ng/mL 为区间 C。
(1)如测得的 OD 值小于标准曲线中 2ng/mL 对应 OD 值,则 BSA 含量测定结果计为小于 2ng/mL。
(2)如不同稀释浓度的样本测得的 OD 值均位于区间 A,则最终结果计算取其min稀释度的测定值。
(3)如不同稀释度的测定值均位于区间 B 或同时位于区间 A 和 B 或同时位于区间 B 和 C,则取其最接近OD16ng/mL 的测定值。
(4)如不同稀释度测定值均位于区间 C,则需将样本做进一步稀释测定,使其测定值居 2~32ng/mL 所对应的 OD 值区间,计算方法按上述 7.3.2-4。
(5)如高稀释度测得OD 高于低稀释度或未稀释的样本OD,则可能是操作失误或样本中BSA 含量过高(HOOK效应),需重试或调整稀释度。
(6)最终结果要考虑稀释因素(实际 BSA 含量=计算值 X 稀释倍数)。

四、本试剂盒技术指标
1、检测限和定量限
检测限:零浓度标准品加上两倍的标准差(20 个零孔计算值),本试剂盒检测限计算为 0.2ng/mL(ppb)。定量限为标准曲线检测下限,1 ng/mL。
2、准确度和精密度
计算批内批间变异系数,在高中低三个浓度(20、10、5)下五个重复检测计算批内变异系数,不同时间重复三次计算批间变异系数,CV%均小于 10%。
3、交叉反应

浓度(ng/ml) SD 回收率% CV% 浓度(ng/ml) SD 回收率% CV%
20 0.06 107.3 5.6 20 0.047 102.6 4.6
10 0.049 105.4 4.7 10 0.022 101.2 2.2
5 0.059 99.66 5.9 5 0.028 97.6 2.9

 本试剂盒对人血白蛋白,小鼠血清,兔血清,鱼明胶没有交叉反应,而对山羊血清有 10%的交叉反应(以相同 OD 值时 BSA 和山羊血清的浓度的比值的百分数为准)。

和 BSA 没有交叉反应的物质
反应物质 反应浓度
人血白蛋白 10mg/ml
小鼠血清 10%
兔血清 10%
鱼明胶 1%
4、钩状效应
当样品浓度远高于标准曲线max浓度的时候,会产生 HOOK 效应,即反应 OD 值小于 32ng/mL 的 BSA 时候的浓度,本试剂盒为 500μg/mL 以上。
性能
储存/保存方法

按照说明书里保存温度保存产品,有效期 6 个月。

注意事项
1、如样品中 BSA 含量高于 32ng/mL,可将样品做适当稀释。
2、样品如为冻干制剂,应用样品稀释液充分溶解混匀。
3、反应时应将整板放入洁净的密闭空间中,为防止反应孔中落入异物。
4、洗涤拍干后,应消除各孔内残余的气泡。
5、开封后,将未使用的板条放回加入干燥剂的密封塑料袋中,置 4℃密闭保存。
6、在操作过程中,所使用的移液器吸头、洗涤机(瓶)、器皿等均应严格避免被有 BSA 的环境和物品污染。
联系方式
手机:18438616290