爱必信(上海)生物科技有限公司
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Xeno-Free人间充质干细胞培养基
  • 品牌:爱必信(absin)
  • 产地:上海
  • 型号:1Kit
  • 货号:abs9401
  • 价格: ¥3108/盒
  • 发布日期: 2023-08-08
  • 更新日期: 2024-02-21
产品详请
产地 上海
保存条件 基础培养基2-8℃,添加剂-20℃至-80℃;混合后2-8℃。保质期:12月
品牌 爱必信(absin)
货号 abs9401
组织来源 -
细胞形态 -
是否是肿瘤细胞
规格 1Kit
保质期 基础培养基2-8℃,添加剂-20℃至-80℃;混合后2-8℃。保质期:12月
器官来源 -
免疫类型 -
品系 -
用途范围 应用于人类骨髓、脂肪、脐带等组织来源的间充质干细胞的原代分离、扩增与传代培养,并保持其多向分化潜能
生长状态 -
物种来源 -
是否进口

产品描述:

Xeno-Free 人间充质干细胞培养基(无酚红)是爱必信自主研发的一款无外源动物成分的人间充质干细胞培养基。可应用于人类骨髓、脂肪、脐带等组织来源的间充质干细胞的原代分离、扩增与传代培养,并保持其多向分化潜能。Xeno-Free 人间充质干细胞培养基主要成分:氨基酸,维生素、无机盐、白蛋白,转铁蛋白、胰岛素、微量元素,细胞因子等。

产品特性:

1)无外源动物蛋白成分,大大降低各类病毒、霉菌和支原体等的污染风险。
2全程无血清生产,极大降低批次间差异。
3可用于原代分离,且培养过程无需包被培养板。
4扩增效率高,24h左右增殖翻倍,节省培养时间。
5内毒素<0.06EU/ml,远低于中国药典水平。

产品内容:

1)组分一:人间充质干细胞基础培养基,450ml

2)组分二:人间充质干细胞添加剂,50ml

应用:

人类骨髓、脂肪、脐带等组织来源的间充质干细胞 原代分离、扩增与传代培养

使用方法:

一、实验准备 

1、人间充质干细胞培养基配制 
(1)37℃快速解冻人间充质干细胞添加剂,快速溶解时不易破坏添加剂中营养物质,时间大致为 10min。待添加剂融化后摇匀,分装或直接按比例添加到基础培养基中,分装后添加剂立即储存于-20℃至-80℃,避免反复冻融 。 
(2)将添加剂以 10%比例加入到人间充质干细胞基础培养基中,混匀,即为人间充质干细胞培养基 (abs9401)。混合后培养基可在 2-8℃ 稳定储存 2-3 周,不建议使用已配制超过 3 周的培养基。 
(3)人间充质干细胞培养基可直接应用于人类骨髓、脂肪、脐带等组织来源的间充质干细胞的原代分离、扩增与传代培养。 


二、操作方法(以下步骤皆应在无菌条件下操作) 

1、hMSC 细胞复苏(10cm dish) 
(1)从液氮中取出冻存的 hMSC 细胞,迅速将冻存管放入 37℃水浴快速融解。 
(2)在生物安全柜或超净台中,将解冻后的细胞悬液缓慢加入 5 mL 预温的人间充质干细胞培养基(abs9401)。 
(3)1200rpm 离心 3 min,吸掉上清,加入 10ml 人间充质干细胞培养基重悬细胞。 
(4)将细胞均匀铺到培养皿中,水平十字振动培养皿使细胞均匀分布,5% CO2的 37℃恒温细胞培养箱中培养 24 小时后观察细胞状态。
(5)24h 后更换新鲜人间充质干细胞培养基继续培养,每 2-3 天更换培养液。 


2、hMSC 细胞传代培养 
(1)在显微镜下观察细胞,当细胞融合度达到 90%,即可传代。 
(2)在超净台/安全柜中,吸掉原有培养基,加入 PBS 溶液清洗一次,加入细胞消化液(abs9411)使之完全覆盖皿/瓶底。 
(3)室温孵育 4-5 分钟或 37℃孵育 2-4 分钟,显微镜下观察大部分细胞脱离皿底即停止消化。 
(4)加入消化液 2 倍体积的人间充质干细胞培养基,用移液器轻轻吹打瓶壁上未完全脱离的细胞,并轻轻吹打混匀,使细胞完全分散。 
(5)将细胞悬液转移到 15 mL 离心管中,1200 rpm 离心 3 min。 
(6)弃上清,加入人间充质干细胞培养基,重悬细胞,计数。1:3-1:4 比例传代,或按 1-2x10cells/cm2 传代,均匀铺在培养皿/瓶中,置于 37℃,5%CO培养箱中培养。 
注意:细胞传代所需的时间:2-4 天。5 代及之前的细胞,生长速度较快。5 代以后的细胞,生长速度稍缓。 


3、hMSC 细胞冻存 
(1)细胞达到 90%汇合度, 吸掉原有培养基,PBS 清洗一次。 
(2)加入细胞消化液(abs9411)使之完全覆盖皿/瓶底,室温孵育 4-5min 或 37℃孵育 2-4min 分钟,显微镜下观察大部分细胞脱离皿底即停止消化。 
(3)加入消化液 2 倍体积的人间充质干细胞培养基,用移液枪轻轻吹打瓶壁上未完全脱离的细胞,并轻轻吹打混匀,使细胞完全分散。 
(4)将细胞悬液转移到 15 mL 离心管中,1200 rpm 离心 3 min,吸掉上清。 
(5)加入适量无血清细胞冻存液(abs9417),调整细胞冻存密度在 1×106 cells/mL 左右,每支冻存管分装 1.5-2ml。 
(6)直接放入-80℃,24h 后转入液氮中长期保存。

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