产地 | 上海 |
保存条件 | 基础培养基2-8℃,添加剂-20℃至-80℃;混合后2-8℃。保质期:12月 |
品牌 | 爱必信(absin) |
货号 | abs9401 |
用途 | 应用于人类骨髓、脂肪、脐带等组织来源的间充质干细胞的原代分离、扩增与传代培养,并保持其多向分化潜能 |
组织来源 | - |
细胞形态 | - |
是否是肿瘤细胞 | 否 |
保质期 | 基础培养基2-8℃,添加剂-20℃至-80℃;混合后2-8℃。保质期:12月 |
器官来源 | - |
免疫类型 | - |
品系 | - |
生长状态 | - |
物种来源 | - |
包装规格 | 1Kit |
是否进口 | 否 |
Xeno-Free 人间充质干细胞培养基(无酚红)是爱必信自主研发的一款无外源动物成分的人间充质干细胞培养基。可应用于人类骨髓、脂肪、脐带等组织来源的间充质干细胞的原代分离、扩增与传代培养,并保持其多向分化潜能。Xeno-Free 人间充质干细胞培养基主要成分:氨基酸,维生素、无机盐、白蛋白,转铁蛋白、胰岛素、微量元素,细胞因子等。
1)组分一:人间充质干细胞基础培养基,450ml
2)组分二:人间充质干细胞添加剂,50ml
人类骨髓、脂肪、脐带等组织来源的间充质干细胞 原代分离、扩增与传代培养
2、hMSC 细胞传代培养
(1)在显微镜下观察细胞,当细胞融合度达到 90%,即可传代。
(2)在超净台/安全柜中,吸掉原有培养基,加入 PBS 溶液清洗一次,加入细胞消化液(abs9411)使之完全覆盖皿/瓶底。
(3)室温孵育 4-5 分钟或 37℃孵育 2-4 分钟,显微镜下观察大部分细胞脱离皿底即停止消化。
(4)加入消化液 2 倍体积的人间充质干细胞培养基,用移液器轻轻吹打瓶壁上未完全脱离的细胞,并轻轻吹打混匀,使细胞完全分散。
(5)将细胞悬液转移到 15 mL 离心管中,1200 rpm 离心 3 min。
(6)弃上清,加入人间充质干细胞培养基,重悬细胞,计数。1:3-1:4 比例传代,或按 1-2x104 cells/cm2 传代,均匀铺在培养皿/瓶中,置于 37℃,5%CO2 培养箱中培养。
注意:细胞传代所需的时间:2-4 天。5 代及之前的细胞,生长速度较快。5 代以后的细胞,生长速度稍缓。
3、hMSC 细胞冻存
(1)细胞达到 90%汇合度, 吸掉原有培养基,PBS 清洗一次。
(2)加入细胞消化液(abs9411)使之完全覆盖皿/瓶底,室温孵育 4-5min 或 37℃孵育 2-4min 分钟,显微镜下观察大部分细胞脱离皿底即停止消化。
(3)加入消化液 2 倍体积的人间充质干细胞培养基,用移液枪轻轻吹打瓶壁上未完全脱离的细胞,并轻轻吹打混匀,使细胞完全分散。
(4)将细胞悬液转移到 15 mL 离心管中,1200 rpm 离心 3 min,吸掉上清。
(5)加入适量无血清细胞冻存液(abs9417),调整细胞冻存密度在 1×106 cells/mL 左右,每支冻存管分装 1.5-2ml。
(6)直接放入-80℃,24h 后转入液氮中长期保存。