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miRNA加尾法逆转录试剂盒
  • 品牌:Absin
  • 产地:上海
  • 货号:abs60265
  • 价格: ¥1760/支
  • 发布日期: 2023-11-09
  • 更新日期: 2024-06-14
产品详请
产地 上海
品牌 Absin
货号 abs60265
用途 见产品详情
纯度 -%
规格 20T,40T
是否进口

产品介绍:

该产品采用基因工程改造的Poly A聚合酶,可为miRNA高效添加Poly A尾,以便于后续的RT反应。逆转录引物为特别设计的含有Oligo d(T)的引物,高度亲和含有Poly A尾的miRNA,使RT反应能够高效进行。它的RT效率优于多家同类产品,尤其是与我们的 miRNA加尾染料法荧光定量PCR试剂配套使用,可免费获得配套的qPCR下游引物和更加理想的实验结果。

产品特点:

1.基因工程优化的Poly A聚合酶,miRNA Poly A聚合高效快速;
2.特别设计的含Oligo d(T)的引物,能够与miRNA Poly A+高效结合,RT效率高于多家同类试剂;
3.同一RNA一次RT可获得多个miRNA的RT产物,后续可进行多个miRNA的检测,节省样本用量;
4.可配套 miRNA加尾染料法荧光定量PCR试剂使用,获得优化的实验结果并可免费获得配套的下游引物。

操作步骤:

1.RNA加A尾: 取RNase-free离心管,配制如下混合液:RNase free ddH2O to 20μl、 Poly A 1μl、2xPoly A Buffer 10μl、RNA 10pg~2ug轻轻混匀,37℃ 30min,迅速置于冰上。
2. RT反应液配制: 上述反应液在使用前5000rpm离心5s:取上述反应液 8μl、2x RT Buffer 10μl 、RTase Mix 2μl用移液器轻轻吹打混匀。
3. RT反应:
25℃  5min
50℃  15min
85℃  5min

反应完毕后,5000rpm离心5s,尽快放于冰上,直接进行PCR反应。如暂时不用,请放置于-20°C以下温度,在半年内使用完毕,不要反复冻融。模板如具有复杂二级结构或高GC区域,可将反应温度提高至55℃。

保存方法:

-20°C 储存,避免反复冻融;有效期1年

注意:

1、用于RT反应的器具和水应进行RNase灭活处理,操作人员应佩戴口罩、手套等,以防RNase污染。
2、模板RNA使用量:总RNA可在10pg~2ug之间。
3、试剂配制过程建议在碎冰上进行,RTase Mix粘度较大,应缓慢吸取,Tip头不要插入液体太深,以免粘染太多酶液。
以合成的U6为样本,使用本试剂盒,加A、反转录,取1/10cDNA产物进行qPCR,CT值小于20

联系方式
手机:18438616290