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miRNA加尾染料法荧光定量PCR试剂盒
  • 品牌:Absin
  • 产地:上海
  • 货号:abs60271
  • 价格: ¥1376/份
  • 发布日期: 2023-11-09
  • 更新日期: 2024-06-20
产品详请
产地 上海
品牌 Absin
货号 abs60271
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纯度 -%
规格 200T,300T;400T
是否进口

产品介绍:

该产品采用本司生产的化学修饰的热启动聚合酶,使用SYBR Green I嵌合荧光法进行miRNA的荧光扩增,具有高度的特异性,能够有效避免引物二聚体形成和其它形式的非特异扩增。反应缓冲液经充分优化,PCR扩增效率高,荧光信号强,反应灵敏度优于多家同类产品。试剂盒免费配置优化后的Tag Primer,使miRNA的扩增效果更有保障。

产品特点:

1.使用化学修饰的热启动聚合酶,反应特异性高,可有效避免非特异扩增;
2.反应缓冲液经充分优化,PCR扩增效率高,拥有更高的反应灵敏度;
3.免费提供优化的Tag Primer,miRNA的扩增效果更有保障。

试剂盒组成:

组份 200T 300T 400T
2× miRNA SYBR Mastermix 1.0ml × 2 1.0ml × 3 1.0ml × 4
 Tag Primer 80uL 120uL 160uL
ddH2O 1.0ml × 2 1.0ml × 3 1.0ml × 4

使用方法:

一、按下表配制反应体系 :取RNase-free离心管,配制如下混合液:

2× miRNA SYBR Mastermix 10uL
Specific Primer(10uM)a 0.4uL
Tag Primer(10uM)b 0.4uL
Temlate DNA/cDNA 2.0uL
ddH2O to 20uL
注:a. Specific Primer 指 miRNA 的上游特异性引物,即由本公司设计的正向引物,一般标注为:xx-miR-X-X-F,该引物可自行设计合成,本公司也可免费提供设计;若使用 U6 作为参照时,Specific Primer 标注为 U6-Forward Primer。
b. Tag Primer 为本公司专用 miRNA 反向引物,若使用 U6 作为参照时,Tag Primer 标注为 U6-Reverse Primer。

二、设置反应条件:  
激活Taq  95℃ 5min
PCR循环 95℃ 10S;60℃ 30S;40循环
熔解曲线 95℃ 15S;60℃ 1min;95℃ 15S;1循环
* 仪器类型不同,熔解曲线采集程序不同,使用仪器默认熔解曲线采集程序即可。

保存方法:

-20°C 避光储存,避免反复冻融;有效期1年。

注意事项:

1、一般来说反应体系中引物终浓度为0.2uM可得到较好的扩增效果。当反应结果不理想时,可以在0.1-1.0uM范围内调整引物浓度。
2、加样体积一般不超过2.0uL,刚开始实验建议进行优化摸索,可分别取2.0uL RT原液及2、4、8、16、32、64倍稀释液进行qPCR。
3、如PCR结果不甚理想,可考虑采用3段法温度设置进行扩增,扩增条件为:95℃ 5min;95℃ 10S;60℃ 20S;70℃ 20S(收集荧光信号)。
4、试剂保存与操作过程中避免强光照射。
5、配制反应体系时,避免过于震荡,以防气泡产生。
6、购买该系列配套产品,公司免费提供引物设计,具体详情请与公司客服联系。
7、以合成的U6为样本,加A、反转录,使用本试剂盒,按本说明书进行qPCR,CT值小于20。
8、如每次使用量较少,推荐小份分装使用。

联系方式
手机:18438616290