外泌体分离总出问题？无外泌体血清如何减少背景干扰

无外泌体胎牛血清｜从源头降低外泌体实验外源囊泡背景干扰

外泌体分离是胞外囊泡研究的基础环节，从细胞培养上清中获取高纯度内源外泌体，直接决定下游鉴定、功能实验与组学分析的数据可靠性。普通胎牛血清含有大量牛源外泌体，这些外源囊泡会混入样本，造成颗粒计数虚高、蛋白印迹杂带、测序数据被异种核酸污染等问题。选择合适的无外泌体血清，是降低实验背景干扰的第一步。

普通血清为什么会干扰外泌体分离？

普通胎牛血清中天然存在大量 30?150nm 牛源囊泡，携带牛源蛋白、miRNA 等物质。细胞培养过程中，这类囊泡释放至培养基上清，在外泌体超速离心、沉淀提取等步骤中会和细胞自身分泌的外泌体共沉淀，无法通过常规分离手段去除，最终造成实验结果假阳性与数据波动，导致实验重复性变差。

无外泌体血清如何保障外泌体分离质量？

无外泌体血清采用多级超速离心联合纳米过滤工艺，最大限度去除血清内部牛源囊泡，同时保留血清内生长因子、氨基酸、激素等细胞增殖必需营养物质，兼顾细胞培养性能与样本纯净度。使用该血清配制培养基培养细胞，收集的上清中外源囊泡背景显著降低，后续超速离心、PEG 沉淀、尺寸排阻色谱等分离方法获得的外泌体样本，更适用于 NTA 粒径检测、TEM 电镜观察、WB 标志物验证以及蛋白组、转录组测序等实验。

哪些外泌体分离相关实验必须使用无外泌体血清？

凡是需要收集细胞上清获取细胞内源外泌体的研究场景，均建议使用无外泌体血清配制培养基。主要包含四类实验：外泌体分离与鉴定实验；外泌体介导细胞通讯、迁移侵袭等功能验证；外泌体蛋白组、转录组测序分析；肿瘤、干细胞微环境体外模型构建实验。普通细胞扩增传代，不涉及囊泡提取分析，则可使用常规胎牛血清。

在开展外泌体分离前，优先选用适配的无外泌体血清，可以从源头减少外源囊泡干扰，减少实验反复，提升数据可重复性。

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